宫内二噁英暴露对类固醇激素基因网络调控的跨代遗传研究

二噁英为一类环境内分泌干扰物(EDCs)，随着社会发展，其排放呈增长趋势。生殖和内分泌毒性是二噁英最为严重和敏感的效应终点。本项目在前期研究基础上，拟从TCDD对类固醇激素基因网络调控机制出发，探索孕期暴露的跨代遗传效应。在胎儿生长关键期对亲代孕鼠进行TCDD染毒，横向(暴露鼠和对照鼠)和纵向(子一代、子二代和子三代)比较睾丸组织类固醇激素关键酶与核受体基因网络的甲基化改变，并通过测序确定甲基化改变位点；通过体外睾丸间质细胞培养染毒，进行特异性碱基片段质粒构建和细胞转染，分析转染片段对间质细胞睾酮生成、StAR表达和细胞功能影响。本项目以期探明TCDD对于子代类固醇激素合成和功能发挥的影响，并以此为切入点借助表观遗传修饰方法探索此种干扰在跨代遗传发生、发展过程中的作用，从而为 TCDD的跨代遗传效应提供理论依据，并为EDCs在人类后代中引发的生殖内分泌改变建立新的研究思路。

二噁英是典型的环境内分泌干扰物(EDCs)，生殖和内分泌毒性是二噁英最为严重和敏感的效应终点。本研究以SD大鼠宫内暴露于TCDD对子代的影响做探索性实验研究，以TCDD干扰印记基因的建立和/或维持，干扰类固醇激素基因网络调控为切入点，从表观遗传水平和分子水平深入探讨TCDD对子代生殖和内分泌影响的机制。结果显示TCDD孕期染毒可造成子代出现一定比例的不良妊娠结局，对胎鼠体重、胎盘质量、身长、尾长、AGD和CAL造成影响。F1代仔鼠围产期体重、身长、尾长和AGD不同程度的低于对照组，并显示了TCDD宫内暴露效应的长远影响。BSP法对100ng/kg和500ng/kg雄胎鼠胎盘甲基化状态进行测定，结果提示宫内暴露TCDD可造成雄胎鼠胎盘Igf2-H19印记控制区域的甲基化模式改变，该改变可能是造成染毒组一定比例的不良妊娠结局形成的原因之一，与胎鼠体重的下降有关，并且通过影响印记标记的建立和/或维持，可能在日后子代生殖系统发育过程中造成甲基化的错误。由于TCDD是内分泌干扰物，该DNA甲基化状态的改变也提示了在印记的建立和/或维持过程中甾体激素相关信号途径的参与。实时定量PCR试验结果显示：100ng/kg和500ng/kg组雄胎鼠胎盘组织中关键的类固醇生成酶P450scc，3β-HSD，CYP17 mRNA表达量相对于对照组降低，提示TCDD在类固醇生成关键时期染毒可干扰类固醇的生成过程，造成胎儿雄性激素合成的降低，进一步影响雄性生殖系统的发育。