基于化学小分子探针的蛋白激酶新型荧光分析方法的建立

本项目拟设计合成一系列荧光肽类小分子探针，通过改变荧光报告基团、多肽的长度以及报告基团与磷酸化位点的距离等因素，优化该小分子探针的结构，使该类探针在磷酸化前后表现出显著不同的荧光性能，达到在细胞内环境中实时分析蛋白激酶活性的目的。通过对多肽骨架中氨基酸的选择及修饰，提高该分子探针的细胞透膜性、稳定性和降低细胞毒性；并将该探针应用于研究抗凋亡蛋白Bcl-2胞内的磷酸化过程，确定该蛋白的磷酸化位点及相应的蛋白激酶种类，探讨该蛋白的磷酸化在细胞凋亡线粒体途径信号转导机制中的作用。