自噬调控慢性非细菌性前列腺炎IL-1β表达的作用机制研究

It has demonstrated that cytokine IL-1βplay a critical role in chronic non-bacterial prostatitis(CNP), however , however, little is known about the its key regulatory molecules mechanisms and regulation rules. Previously study show that autophagy regulate the development of inflammation, and its mechanism may be through NLRP3 inflammasome and NF-κB, and NLRP3 inflammasome and NF-κB signal regulate the expression of IL-1β, this suggestion that the mechanisms of autophagy regulate the IL-1β through NLRP3 inflammasome and NF-κB signal. So, We will intend to study breakthrough point of autophagy,apply the rats models of CNP, aim to study the role of autophagy regulate NLRP3 inflammasome and NF-κB and IL-1β in CNP; To explore the effect autophagy on NLRP3 inflammasome and NF-κB signal and investigate the mechanisms of autophagy regulate the IL-1β; To study its mechanisms of the molecular regulatory and reveal the key regulatory sites and signaling pathways. It provide the pathogenesis mechanisms of CNP, and provide the new strategies and targets in CNP

研究表明，细胞因子IL-1β在慢性非细菌性前列腺炎(CNP)的发病中起着关键性作用，但目前对此过程关键分子调控机制和规律仍然不清。已有研究显示自噬调控炎症的发生发展，其机制可是通过NLRP3炎症体和NF-κB信号通路的，而NLRP3炎症体和NF-κB信号途径调控IL-1β的表达。我们前期研究显示自噬可能参与调控CNP中 IL-1β的表达，提示自噬调控CNP中 IL-1β表达的机制可能是通过NLRP3炎症体和NF-κB信号通路。因此，本项目以自噬为切入点，拟采用CNP大鼠模型，研究CNP中自噬对NLRP3炎症体、NF-κB和IL-1β调控作用；探讨CNP中自噬对NLRP3炎症体和NF-κB的作用，阐明自噬对CNP中IL-1β调控机制；研究自噬调控CNP中IL-1β分子网络组成、动态变化，揭示其关键调控位点和信号通路。为CNP的发病机制提供新的理论依据，并为CNP防治提供新的策略与作用靶点。

慢性非细菌性前列腺炎（CNP）是泌尿外科常见病和多发病，由于目前对CNP的发病机制及病理生理学改变还不十分清楚，导致治疗效果欠佳，复发率高，治愈率低。研究表明，细胞因子IL-1β在CNP的发病中起着关键性作用，但目前对此过程关键分子调控机制和规律仍然不清。已有研究显示自噬调控炎症的发生发展，其机制可是通过NLRP3炎症体信号通路的，而NLRP3炎症体信号途径调控IL-1β的表达。本项目以自噬为切入点，拟采用CNP大鼠模型，研究CNP中自噬对NLRP3炎症体和IL-1β调控作用；探讨CNP中自噬对NLRP3炎症体作用，阐明自噬对CNP中IL-1β调控机制。.本研究中我们建立CNP小鼠模型；HE和免疫组化检测CNP前列腺组织炎症情况；ELISA方法检测小鼠血清和前列腺蛋白提取物中IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-17等炎性细胞因子水平；行为学痛觉检测模拟前列腺炎患者疼痛症状；Western Blot、免疫组化方法检测相关蛋白的表达水平。结果发现相比对照组，小鼠血清和前列腺蛋白提取物中IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-17等炎性细胞因子水平明显升高，而对照组及对照组无明显变化；对照组前列腺组织未见明显炎性细胞浸润；CNP组炎症较明显；Western Blot结果显示NLRP3炎症小体通路在CNP组激活；免疫组化结果显示NLRP3炎症小体复合物各组分:NLRP3、ASC、Caspase-1在CNP组表达明显升高；使用炎症小体NLRP3抑制剂MCC950后NLRP3相关蛋白被抑制；H&E染色显示使用NLRP3炎症小体抑制剂MCC950后，炎症明显改善；使用雷帕霉素后免疫组化提示IL-1β 表达降低，疼痛行为学实验动态表明注射雷帕霉素后模型鼠疼痛明显降低；加入雷帕霉素后，正常组及CNP组均可以观察到LC3表达升高，p62水平降低，而3-MA可以逆转这种改变，表明加入雷帕霉素后自噬水平明显升高；自噬能显著抑制NLRP3炎症小体和IL-1β 表达。.我们的研究初步揭示CNP中，NLRP3炎症小体通路被激活；NLRP3抑制剂MCC950可以抑制炎症小体通路的激活，并减轻炎症，自噬能调控NLRP3炎症小体和IL-1β 表达。本研究为CNP的发病机制提供新的理论依据，并为CNP防治提供新的策略与作用靶点。