内皮型一氧化氮合酶对缺血再灌注血管平滑肌钙和收缩调控的分子机制

缺血再灌注损伤(IRI)是治疗缺血性心、脑血管疾病亟待解决的关键问题。过去的研究主要集中在心肌细胞，新近的临床实验发现微血管损伤是导致IRI的重要因素。本项目拟采用药物干预或人内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因转染大鼠肠系膜动脉和家兔冠脉微血管，通过细胞边缘探测和张力描记技术研究血管的舒缩功能，探讨缺血再灌注对血管平滑肌的损伤作用及eNOS的保护作用；运用生物素转换方法研究eNOS及一氧化氮（NO）对L-型钙通道、肌浆网钙泵等钙调控蛋白的S-亚硝化作用，探讨eNOS抑制再灌注细胞内钙升高的方式及位点；采用Western blot、激光共聚焦显微成像等技术研究血管平滑肌收缩调控蛋白的表达及其对钙的敏感性，探讨eNOS对缺血再灌注血管平滑肌异常收缩的调控方式。本实验有望揭示缺血再灌注对微血管的损伤作用及eNOS的保护机制，有利于寻求药理性干预的细胞内新靶点，对IRI的防治将具重要的临床意义。