DDHD1在急性肾损伤肾小管上皮细胞凋亡中的作用机制研究

Acute kidney injury (AKI) is a commonly critical syndrome. Unfortunately, there’s no effective treatment apart from prophylactic measures. The proximal tubule cell apoptosis highly impacts on outcomes. We previously indicated that miR-17-5p protected kidney in a p53-dependent manner by inhibiting apoptosis, which seems to be regulated in an unknown bypass. Recent studies suggest DDHD1 (intracellular phospholipase A1 family member) regulates the mitochondrial dynamics that may affect apoptosis. We previously showed DDHD1 up-regulated by hypoxia in RPTC to induce apoptosis. There are binding sequences within promoter region and 3’UTR of DDHD1 to response with p53 and miR-17-5p, respectively. In this study, we investigate the functional role of DDHD1 in AKI by using the proximal tubule knockout mice. We also explore the mechanisms between p53-miR-17-5p signaling and DDHD1 by modulating the mitochondrial dynamic. We will provide the future target of therapeutic strategy.

急性肾损伤(AKI)是临床最常见严重影响患者预后的危重症，除预防措施外，尚无有效治疗方案。肾小管上皮细胞凋亡是影响AKI发病和预后的关键因素之一。我们前期研究表明MicroRNA17-5p（miR-17-5p）可通过抑制凋亡在AKI中发挥肾脏保护作用，且依赖于p53信号调控，但具体机制尚未阐明。最新研究发现细胞内磷脂酶A1家族主要成员DDHD1调控线粒体功能，可能参与细胞损伤及凋亡。我们前期发现DDHD1在肾小管上皮细胞缺氧刺激后高表达且影响细胞凋亡，其启动子区存在p53调控位点而3’UTR区则同时存在miR-17-5p绑定序列。本项目拟利用DDHD1条件性近端肾小管敲除小鼠探索其在AKI中的作用，并进一步利用miR-17-5p模拟物及显性失活突变p53阐明DDHD1作为p53-miR-17-5p信号通路的旁路调控参与介导线粒体损伤的机制，从而为AKI寻找新的治疗靶点提供理论基础和实验依据

急性肾损伤 (AKI)是临床常见危重症，由于缺乏有效早期诊断及治疗措施，AKI患者多数进展为慢性肾脏病 (CKD)，并最终发展为终末期肾病。研究表明，AKI早期损伤出现在近端肾小管上皮细胞，损伤后细胞凋亡是其病理基础。存活下来的肾小管上皮细胞通过去分化及增殖，修复肾组织结构并恢复肾功能。因此明确肾小管上皮细胞凋亡的分子机制，对AKI治疗及远期预后至关重要。. 本研究在前期microRNA芯片及相关microRNA17的研究基础上，通过数据库比对及文献查询，筛选出可能调控肾小管上皮细胞凋亡及增殖的相关下游靶基因，其中磷脂酸酯酶A1 (DDHD1)由于在某些因素下转位至线粒体，并通过水解其表面磷脂影响其功能，可能参与细胞凋亡、增殖、炎症反应等多种生物学进程，因此本研究以DDHD1的相关作用及调控机制作为研究切入点。结果表明，在顺铂诱导的AKI模型中，肾脏皮质及肾小管细胞中DDH1表达显著表达显著上调，体内／体外敲低其表达显著改善肾小管上皮细胞凋亡及肾组织病理。DDHD1上游受转录因子HNF-1b调控，并通过Tim-3依赖性通路间接诱导NF-KB p65磷酸化及细胞核转位，进一步调控肾小管上皮凋亡及肾组织病理修复。. 本研究阐明了AKI早期肾小管上皮细胞凋亡的分子机制，对AKI早期诊断及判断其病理转归具有重要价值，并为AKI治疗提供了新的靶点，对其远期预后有着重要临床意义。