ERM蛋白对类风湿关节炎滑膜细胞活化、增殖和迁移的调控及其机制研究

滑膜组织异常活化、增生和迁移在类风湿关节炎（RA）的发病和病情进展中起关键作用，但其调控机制尚不清楚。近年研究显示细胞骨架蛋白相关ERM（ezrin/radixin/moesin的简称）可能是调控细胞增殖、迁移和信号转导的关键分子，我们前期研究发现RA病人滑膜组织与细胞骨架调控相关的RhoA活化程度显著增高，且与RA滑膜炎症密切相关。因此，基于我们以往的工作基础，本课题利用分子生物学技术，观察ERM及其相关蛋白对滑膜细胞活化、增殖和迁移的调节作用及其内在机制；并进一步观察体内抑制ERM表达对胶原诱导的关节炎（CIA）大鼠关节滑膜组织增生、关节病理损害和关节临床症状的改善作用，旨在研究ERM及其相关信号通路对RA滑膜活化、增生和迁移的调控作用，为研制新型RA治疗药物提供理论基础。

滑膜成纤维细胞（FLS）过度活化、增生和具有侵袭性是类风湿关节炎（RA）关节炎症和破坏持续进展的关键环节。本课题运用分子生物学和现代免疫学技术研究发现，RA患者关节滑膜组织磷酸化ERM和ezrin蛋白表达显著高于骨关节炎患者和正常对照组，IL-1β和TNFα均能刺激RA滑膜成纤维细胞ERM和ezrin蛋白活化，但对ERM蛋白没有显著影响。利用siRNA抑制ERM蛋白表达能显著抑制RA FLS增殖，ezrin磷酸化的特异性抑制剂和siRNA均能抑制RA FLS迁移和侵袭。ERM蛋白的活化受Rho和MAPK通路调控。RhoA通路对TLR-2介导的IL-8、MCP-2和RANTES等趋化因子分泌，同时对RA FLS的迁移和侵袭也有调控作用。Rac1下游关键蛋白PAK1活性在RA滑膜上表达亦显著升高，同时对RA FLS迁移、侵袭和分泌基质蛋白酶也有显著调控作用。此外，还发现TNFα 能通过PAK1“由内到外”（inside-out）途径促使RA滑膜成纤维细胞整合素β1活化。利用CIA动物模型体内证实抑制关节内ERM蛋白表达能改善小鼠的关节病理损害和临床症状。上述研究提示ERM蛋白及其相关信号通路可能参与调控RA滑膜增生和侵袭，通过调控ERM蛋白磷酸化可能是RA治疗的新思路。