两亲性多肽分级组装体的制备及其双重靶向性能研究

从全保护的小分子氨基酸（赖氨酸、精氨酸、天冬氨酸等）出发，利用固相合成技术制备具有特殊功能的多肽（靶向配体RGDKR、跨膜肽RKKRRQRRRGD和寡肽）。利用腙键分别将寡肽与聚乙二醇（PEG）、环糊精与经跨膜肽修饰的阿霉素（DOX）连接起来。利用寡肽引发己内酯（CL）开环聚合制备两亲性多肽高分子，通过环糊精与PCL的主客体作用，及PEG与PCL链端的寡肽间的相互作用，分级组装成pH敏感的多层纳米粒子，完成对DOX的包载与PEG对靶向配体的保护。通过靶向配体对肿瘤细胞的特异性识别作用及跨膜肽对药物分子的跨膜传输作用，实现药物分子对肿瘤细胞的双重靶向。调控寡肽中氨基酸的种类、序列长度与链接结构制备不同形状纳米粒子，并研究其对肿瘤细胞的靶向效果及循环时间的影响，开发靶向性能优良的药物载体。此外还将探讨不同长度的多肽分子对药物释放速率的调控及对抗肿瘤效果的影响。

利用固相合成技术制备了含有RGD序列的靶向肽GRGDS-NH2、穿膜肽RKKR RQRR RGD-NH2，以及P53的核心功能肽LSQE TFSD LWKL LPED GR-NH2、TRAF6功能肽DRQI KIWF QNRR MKWK K-NH2与骨形态发生蛋白仿生肽（SSVPT-NH2）等。.（1）制备了两亲性的N-异丙基丙烯酰胺与十一碳烯酸的共聚物，在其双键功能化后（polymer），与N-异丙基丙烯酰胺、丙基丙烯酸共聚制备纳米凝胶（NG），并对NG的形貌与温度敏感性等进行了研究。研究表明，此纳米粒子的最低相转变温度（LCST）约为34oC，且由于聚合物polymer的自组装使得纳米粒子的载药的效率大大提升；经GRGDS-NH2短肽修饰之后的纳米粒子能被肿瘤细胞靶向吞噬，并在37oC时将所包载的药物在细胞内释放出来杀死癌细胞，从而表现出较好抗肿瘤效果。.（2）将穿膜肽RKKR RQRR RGD-NH2修饰阿霉素（Dox）后，利用腙键将其与-环糊精连接起来，并利用-环糊精与聚己内酯（PCL）之间的主客体相互作用，调节金刚烷基封端的双亲分子mPEG-b-PCL-Ad的亲疏水性，以自组装成稳定的纳米粒子，可将Dox包载于纳米粒子之中，并研究了其对体外肿瘤细胞的靶向性能与抗肿瘤的效果。.（3）分别利用P53与TRAF6的功能肽和硬脂酸进行缩合，制备了LSQE TFSD LWKL LPED GR-b-硬脂酸与DRQI KIWF QNRR MKWK K-b-硬脂酸等双亲性高分子，并研究了其分子的分级自组装行为、药物控释性能以及抗肿瘤效果。.（4）利用开环聚合制备的聚-谷氨酸寡肽与PEG缩合制备了-PGA-b-PEG，并研究了不同条件下-PGA的二级结构（-螺旋）对药物分子的包载能力、缓控释性能以及对细胞的存活率的影响，结果证明：在不同的pH下，PGA的二级结构的形成可实现药物控释的效果。.（5）经仿生BMP2短肽对纳米羟基磷灰石（HA）表面进行化学键合后，与聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）制备了生物活性的骨修复材料，并对材料的诱导矿化、细胞黏附等性能检测发现，利用BMP2活性短肽上的活性位点及其在材料表面组装形成的结构，可优化材料的生物活性。