采用RT—PCR策略,从盐生植物中亚滨藜中克隆了甘氨酸甜菜碱合成的关键酶BADH的cDNA,并对其诱导表达特性进行了系统研究,确证该基因属专一性盐诱导表达。通过Southern杂交证实中亚滨藜基因组中仅存在单拷贝BADH基因。在此基础上构建了中亚滨藜的入基因组文库,以BADH cDNAS(,)端片段为探针,筛送获得了含BADH启动子的阳性克隆(外源片段最长为7.4kb),对该启动子区域进行了物理图谱分析,同时进行亚克隆与全序列分析。根据序列分析结果,构建一系列5(,)端和3(,)端缺失的可能的盐诱导启动子,分别将其插入了植物双元表达载体中以驱动采自大肠杆菌的胆碱脱氢酶(CDH)基因在植物中的表达,大规模的拟南芥转化及上述启动子效率的检验尚在进行中。
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数据更新时间:2023-05-31
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