基于免疫调控的山豆根治疗乙型肝炎的作用机制及物质基础研究

Chronic hepatitis B (CHB) is not only a kind of infectious disease, which severely harm for human life and healthy, but also one of the most serious public health issue to China. Heat-clearing and detoxifying drugs such as Radix Sophorae Tonkinensis (ST) are a set of traditional Chinese medicines commonly used to treat CHB in clinic, which have shown definite effect in improving clinical symptoms, liver function and jaundice but whose mechanisms are not clearly demonstrated. Furthermore, there remains controversy about whether heat-clearing and detoxifying drugs can eradicate the HBV from the body directly. In this project, we propose the mechanism of ST is related to immunoregulation in treating CHB, based on the frontier understanding that CHB is an autoimmune disorder. The regulatory function of ST to the immunocytes and relative cytokines in CHB patients is investigated focusing both HBV specific immunity and natural immunity. The study is performed following the translational medicine of Bedside to Bench and back to Bedside model, well supported by the superiority of 302 Military Hospital in the field of viral hepatitis. The immunological mechanism and chemical basis of ST in treating CHB are confirmed by the combinational approaches with network pharmacology and metabolomics. The study would provide important evidences to elucidate the immunological mechanism and pathway in treating CHB of the heat-clearing and detoxifying drugs.

乙型病毒性肝炎（乙肝）是一种严重危害人体生命健康的传染病，也是我国最严重的公共卫生问题之一。清热解毒药如山豆根是临床上治疗乙肝的常用中药，在改善症状、保肝降酶、利胆退黄疗效确切，但作用机制尚不明确，尤其是是否具有直接清除乙肝病毒作用尚存争议。基于“乙肝实质上是一种免疫性疾病”这一现代医学认识，本项目突出从免疫调控角度，探究山豆根治疗乙肝的作用机制及物质基础。具体来说，依托解放军302医院在病毒性肝炎领域的学科优势，遵循“临床-实验室-临床”的转化医学研究路径，从HBV特异性免疫及天然免疫两个层面，考察山豆根对慢乙肝患者关键免疫细胞及相关细胞因子的调控作用，结合网络药理学和代谢组学分析，综合阐明山豆根治疗慢乙肝的免疫学机制和主要物质基础。研究结果将为科学论证清热解毒中药是否直接清除乙肝病毒的客观真实性，揭示清热解毒中药治疗乙肝的免疫学机制和关键途径提供重要证据。

本项目拟系统阐释山豆根治疗慢乙肝的免疫学机制和主要物质基础。基于本项目拟解决的关键科学问题和研究目标，课题组通过整合网络药理学与代谢组学系统分析了山豆根保肝抗炎、抗HBV的主要作用靶标和机制, 研究发现山豆根可能主要作用于16个靶标发挥作用。通过系统筛查发现了山豆根中苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱和槐定碱等四个主要抗病毒活性成分，并利用体内外模型阐明了其作用机制；考察了四种成分联合胸腺肽、干扰素等临床用药的抗病毒作用，研究表明四种成分联合胸腺肽和干扰素均具有协同增效作用并揭示了其免疫学机制；针对恩替卡韦耐药问题，利用自主构建的恩替卡韦耐药株，开展了山豆根活性成分联合恩替卡韦抗耐药HBV的研究，结果表明四种成分均可促进耐药HBV的清除，其中氧化苦参碱效果最佳；针对体内HBV模型难以评价药物抗HBV病毒的免疫学作用及机制，本课题构建了具有完全免疫反应能力的高压水动力法和rAAV8慢病毒介导的HBV小鼠模型，分别对氧化苦参碱和山豆根制剂肃毒星进行了抗病毒研究并阐明了其免疫学机制，为综合运用山豆根治疗慢乙肝提供了依据，同时利用多种肝损伤和肝纤维化模型对山豆根主要活性成分抑制肝损伤和抗肝纤维化作用进行研究，证实了槐果碱等多种成分保肝及抗肝纤维化作用及其免疫学机制；课题组对山豆根及其相关制剂临床治疗慢性乙肝及相关疾病进行了临床系统评价和研究，Meta分析结果表明山豆根相关制剂具有明确的抗HBV和降低癌性疼痛的作用，同时II期临床试验研究证实山豆根制剂珠参清肝胶囊对HBeAg阳性和HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者的治疗价值，为临床后续研究提供了基础。课题共发表论文13篇，其中SCI论文8篇，单篇论文最高影响因子6.01，申请专利1项，培养研究生10名。课题负责人于2014年入选首批全军科技领军人才，2018年获得国家中医药管理局岐黄学者荣誉称号。课题主要参与者王伽伯入选2016年北京市科技新星计划并荣获2017年国家“万人计划”科技领军人才荣誉称号，柏兆方入选2018年北京市科技新星计划。