HHV-6B病毒感染诱导炎性网络在颞叶内侧癫痫中的作用机制

Temporal lobe epilepsy is a progressive neurological disorder that resistant to multiple anti-epileptic drugs. In recent studies, human herpes virus (HHV) 6B was detected in a number of patients and was verified as a promoting factor of inflammatory response associating with hippocampus sclerosis and gliosis of meisial temporal lobe epilepsy (MTLE).However, the mechanism of activating inflammatory factors is not clear till now. In our recent study where active NFkB, was associated with HHV-6 infected cells in MTLE patients. We hypothesize that the neuroinflammatory response to HHV-6B infection contributes to the chronic progression of MTLE due to activation of inflammatory factors. A research to investigate HHV-6B infection and the expression of neuroinflammatory molecules in MTLE patients will be performed in 100 samples from patients with MTLE.The activation of virus will be detected by nestPCR,IHC; the expression of inflammatory factors also will be dected. The vitro experiment of culturing astrocytes and investigatiing impact of on virus protein and inflammatory factors also will be performed. This study will determine the relationship between HHV-6B in the CNS, the chronic inflammatory environment within brain tissue and MTLE as well as identify targets for theraputics for the treatment of MTLE.

颞叶内侧癫痫表现为慢性进展性病程且对多种抗癫痫药物耐药.近期研究发现单纯疱疹病毒6型（HHV-6B病毒）感染与MTLE相关,感染诱导的炎症因子的表达参与了海马硬化和胶质增生的病理生理过程，但炎性因子激活及衍变的机制不清。前期研究发现MTLE患者脑组织存在HHV-6B病毒活化并伴核转录因子NF-kB表达变化，据此假设HHV-6病毒感染诱导的炎性网络因子激活与MTLE慢性炎性环境形成及其耐药密切相关。因此，我们拟测定100例MTLE患者术后脑组织中HHV-6B阳性感染率，结合病毒核酸分析和病毒外壳蛋白测定明确病毒特性，并检测炎性网络上关键因子的表达水平；我们还拟在体外实验中培养星形胶质细胞，观察炎性网络中起关键作用的NF-kB阻断剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对病毒蛋白及上述炎性因子表达水平的影响，以探讨HHV-6B病毒感染诱导炎性网络在MTLE中的作用机制。寻找潜在的药物治疗新靶点。

背景：颞叶内侧癫痫表现为慢性进展性病程且对多种抗癫痫药物耐药.近期研究发现HHV-6B病毒感染与MTLE相关,感染诱导的炎症因子的表达参与了海马硬化和胶质增生的病理生理过程，但炎性因子激活及衍变的机制不清。.主要研究内容：我们在研究中应用巢式PCR及实时定量PCR测定癫痫患者脑组织中HHV-6DNA及采用免疫组化测定不同HHV-6病毒外壳靶蛋白的抗体(Pg116/64/54；P98和U94)以测定MTLE患者术后脑组织中HHV-6B不同的状态，并对患者的APoE基因进行分型测定。另一项研究测定颞叶癫痫患者术后脑组织中HHV-6B DNA及蛋白，同时测定12种炎性因子TGF-α, IL-10, IL-1a, IL-1β, IL-9, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, TNF-α and VEGF，并采用Milliplex液相芯片测定颞叶内侧癫痫患者的脑脊液中炎性因子；同时因HHV-7与HHV-6B结构上的高度相似，我们回顾性分析测定了305例表现为难治性癫痫的患者术后脑组织中的单疱病毒7型。.结果及关键数据：测定的46例难治性癫痫患者中，发现18例病毒DNA阳性的MTLE患者16例抗原阳性，而对照组中阳性例数为零。患者ApoE进行分型结果发现HHV-6B阳性与ApoE4无直接相关性，但携带有ApoE4又同时感染HHV-6B病毒的患者其DNA含量及病毒定量较未携带ApoE4而有HHV-6B病毒感染的患者高且有统计学意义；另一项研究在HHV-6B感染的颞叶癫痫患者术后脑组织中，发现炎性因子IL-1，IL-2及IL-7表达上调，而Milliplex液相芯片测定则在HHV-6B感染的颞叶内侧癫痫患者的脑脊液中IL-1和IL-7表达上调；我们亦发现HHV-7感染主要与海马硬化相关，而病毒与中枢神经系统肿瘤无关。.科学意义：该部分研究结果揭示携带有ApoE4的癫痫患者与HHV-6B病毒感染无相关性但可与病毒DNA载量正相关; HHV-6B激活的炎性因子包括IL-1,IL-2 and IL-7。我们亦证实与HHV-6B具有高度同源性的病毒HHV-7感染与海马硬化有相关关系。