miR-375调节B10细胞活性及其在口腔鳞癌发生发展中的作用机制研究

B10 cells are important regulatory B cell subsets and found recently to be associated with tumor progression. However, the underlying mechanisms are still unclear. miR-375 was abnormally expressed in many types of tumors including oral cancers. Our previous study indicated that the expression of miR-375 was decreased while the TLR4 increased in oral squamous cell carcinoma (OSCC). Bioinformatics analysis showed that TLR4 is possibly the direct target gene of miR-375. We also found that TLR signaling was involved in the induction of B10 cells competency. Therefore, we hypothesize that miR-375 may regulate the B10 cells activity via TLR4 signaling, thereby affecting the progression of OSCC. This study is to investigate the relationship between B10 cells activity and OSCC, the possible role of TLR4 signaling in the regulation of miR-375 to B10 cells, and their influence on the growth, proliferation, invasion and metastasis of OSCC. The results of this study are expected to provide new ideas to clarify the pathogenesis of OSCC.

B10细胞是调节性B细胞的重要亚类，研究发现B10细胞参与肿瘤的发生发展，但作用机制不明确。miR-375在口腔癌等多种肿瘤中异常表达。我们发现，口腔鳞癌组织中miR-375低表达，而TLR4高表达；生物信息学分析显示TLR4可能是miR-375的直接靶基因。近期体内外研究表明，TLR信号通路参与诱导B10细胞活性。据此我们推测：miR-375可能靶向TLR4信号通路调节B10细胞活性，影响口腔鳞癌的进展。本项目拟构建多种体内外模型，研究B10细胞活性与口腔鳞癌临床病理及预后的关系，探讨TLR4信号通路在miR-375调控B10细胞活性的作用及其对肿瘤生长增殖和侵袭转移的影响，为阐明口腔鳞癌发病机理提供新思路。

miR-375在口腔癌等多种肿瘤中异常表达,但与口腔癌的发生发展的相关性尚不明确。肿瘤微环境对肿瘤的生长和进展起重要作用，作为肿瘤免疫微环境中的一员，具有负性免疫调节作用的B细胞（B10细胞）在口腔癌中的作用仍不明确。本研究项目结果包括以下三方面内容：（1）miR-375在OSCC中的表达及作用；（2）建立一种新型的基于肿瘤及免疫微环境的舌鳞癌预后模型；（3）B10细胞在OSCC小鼠中的表达及其在抗PD-1治疗OSCC中的作用。. 为此，我们首先在组织学层面证实了miR-375在OSCC组织中为低表达，筛选OSCC细胞系用于体外实验，通过细胞转染实验，验证了miR-375低表达促进OSCC细胞的增值和迁移。其次，基于肿瘤及免疫微环境的各种评价指标，我们建立了一种新型舌鳞癌预后模型。最后，通过OSCC小鼠模型检测OSCC小鼠的B10细胞的表达和表型，并分析其在抗PD-1免疫疗法治疗口腔癌中的作用进行了初步探讨。