Neurotensin/sortilin调控小胶质细胞构建胶质瘤干细胞炎症微环境的机制研究

It has confirmed that inflammation regulated generation and progression of tumor stem cell, but the mechanism which architects inflammatory niche of tumor stem cell is still unclear. Our previous work found glioma stem cell(GSC) promoted chemotaxis of microglia(MIG), attracted MIG to its surrounding, activated JAK2/STAT3 signal pathway of MIG, induced MIG’s immunosuppressive phenotype and architect inflammatory niche of GSC. VEGF could induced immunosuppressive MIG, however, further researches found GSC could regulate MIG through “VEGF-independent pathway” which needed to explore urgently. We also discovered neurotensin(NTS) was up-regulated apparently in GSC, blockage of NTS could inhibit activation of STAT3 signal pathway in MIG induced by GSC. It has reported that only neurotensin receptor 3 (Sortilin, SORT) expressed in MIG, activation of SORT could promote expression of pro-tumor inflammatory mediators. We hypothesize that GSC up-regulates NTS which activates SORT and its downstream JAK2/STAT3 signal pathway in adjacent MIG, architects the inflammatory niche of GSC. This research programme is the extension and complement of our previous work, we plan to explore the role of NTS/SORT/STAT3 signal axis in the architecture of GSC''s inflammatory niche initiated by microglia and provide a new strategy for GSC-targeting therapy of malignant glioma.

炎症调控肿瘤干细胞的发生演进，但肿瘤干细胞炎症微环境构建机制不详。前期工作证实，胶质瘤干细胞（GSC）趋化小胶质细胞（MIG）至其周围，激活MIG的STAT3通路，诱导MIG免疫抑制表型，构建GSC免疫微环境。VEGF能够诱导MIG免疫抑制表型，但进一步研究发现，GSC激活MIG还存在“非VEGF依赖途径”，该途径急需进一步阐明。我们发现，GSC中神经降压肽（NTS）表达上调，阻断NTS可抑制GSC诱导的MIG中STAT3通路激活。文献证实，MIG仅表达NTS受体亚型3（SORT），激活该受体可上调MIG促肿瘤炎症介质的产生。我们提出假说：GSC上调表达NTS，激活MIG的SORT及下游STAT3通路，诱导MIG免疫抑制表型，构建GSC炎症微环境。本研究是前期课题的延续和补充，拟揭示NTS/SORT/STAT3信号轴在构建GSC炎症微环境中的作用，为靶向GSC的胶质瘤治疗策略提供新的思路。

神经降压肽（NTS）及其受体系统在胶质瘤演进和小胶质细胞（MIG）依赖性免疫抑制微环境形成中发挥重要作用，但具体机制不详。我们前期工作提示，胶质瘤干细胞（GSC）趋化MIG至其周围，通过激活 MIG 的 STAT3 通路，诱导 MIG免疫抑制表型。GSC 上调表达NTS，阻断 NTS 可抑制 MIG 中 STAT3 通路的激活，而NTS受体亚型中又仅有亚型3（Sortilin，SORT）在MIG中表达。因此，我们提出假说： GSC 上调表达 NTS，激活 MIG 的 SORT 及下游 STAT3 通路，诱导 MIG 免疫抑制表型，构建 GSC 炎症微环境。.我们按照计划执行完成了所有既定工作：.1、分析NTS和SORT在各病理级别人胶质瘤样本中的表达情况，分析其表达部位和水平与GSC数量和定位之间的关系。证实在恶性胶质瘤中，NTS、NTSR1和SORT表达水平均与病理级别正相关，与患者的预后负相关。SORT表达水平与胶质母细胞瘤患者预后的关系还存在分子亚型特异性。SORT可能成为判断胶质瘤患者预后的指标，并可能在GBM特定分子亚型分子靶点的筛选上提供线索。 .2、分析了NTS对MIG中integrinαvβ3表达水平的影响，检测了integrinαvβ3与MIG运动迁移的关系。证实GSC表达的NTS通过SORT上调MIG中integrinαvβ3的表达，提升p-Akt的磷酸化水平进而促进MIG运动迁移。.3、分析了NTS/SORT/STAT3信号轴激活状态对MIG免疫抑制表型的影响。证实GSC表达的NTS通过激活MIG中的SORT上调JAK2/STAT3的磷酸化水平，诱导M2型MIG的产生和促肿瘤炎症介质的释放，为靶向 GSC 的胶质瘤治疗策略提供了新的思路。.此外，针对研究中新出现的线索，围绕Neurotensin/SORT促瘤新机制，我们进行了近一步探究：.1. 证实SORT能够上调GSC中GSK-3β磷酸化水平，抑制β-catenin磷酸化和降解，上调GSC侵袭能力，从而为抑制胶质瘤的侵袭和复发提供了潜在靶点。.2. 证实NTS通过NTSR1/c-myc/miR-29b-1/CDK4,6和NTSR1/miR-129-3p/CDK6信号通路促进胶质瘤细胞的增殖。该信号通路可能成为NTS/NTSR1高表达胶质瘤的潜在治疗靶点。