大豆疫霉卵孢子形成早期特异表达基因的筛选和功能分析

大豆疫霉引起的根腐病是大豆生产上的毁灭性病害，存在于土壤或病残体中的卵孢子是其初侵染源。采用抑制性差减杂交(SSH)技术,筛选大豆疫霉从启动卵孢子原基分化到卵孢子形成阶段特异表达的基因，通过与大豆疫霉全基因组数据库和国际公共真菌基因数据库进行序列比较,分析这些基因的可能功能。进一步采用实时PCR 技术检测候选基因在大豆疫霉生长发育和侵染寄主植物的不同阶段的表达特征，以验证候选基因的差异表达性状。再与大豆疫霉菌数据库进行序列比较,筛选候选基因的全长ORF 序列并构建其RNA 干涉载体，转化大豆疫霉，干扰候选基因的积累，分析突变体的卵孢子形成性状，进而分析这些基因在大豆疫霉卵孢子形成过程中的作用。同时通过与真核生物代谢途径的比较分析，初步明确大豆疫霉控制卵孢子形成的关键代谢途径和信号传递网络。研究结果可望阐明大豆疫霉卵孢子形成的分子基础，为开发阻断大豆疫霉形成卵孢子的杀菌剂提供分子靶标。