CRAC通道在银屑病角质形成细胞增殖和分化中的作用

银屑病是一种免疫诱导的、过度再生性增殖性皮肤病，严重影响患者的身心健康，为了明确信号传导通路钙释放激活钙离子通道（CRAC）在银屑病发病中的作用，拟采用在体和离体方式，用膜片钳跟踪Ca2+/STIM1/Orial开放度及对细胞内[Ca2+]振荡的振幅和周期关系，结合流式细胞仪对皮损酶分离细胞和培养细胞细胞周期的检测，分析不同病期来源角质形成细胞在不同细胞周期时CRAC的激活程度，并用外源性Ca2+及其拮抗剂干预，探究银屑病角质形成细胞过度增殖和分化的细胞间信号传导及影响因素，为银屑病发病机制的研究拓开新领域，为银屑病的治疗和干预措施提供新思路，也进一步扩展对CRAC在疾病发生过程中的认识。

项目背景：银屑病是一种免疫诱导的、过度再生性增殖性皮肤病，严重影响患者的身心健康。角质形成细胞（KC）是银屑病免疫紊乱的效应细胞，在银屑病皮损区KC生长动力学呈现出一种特殊紊乱状态，KC的异常增殖是体内免疫功能紊乱的结果，其中白细胞介素、肿瘤坏死因子、干扰素、生长因子、炎症因子等都与免疫功能的紊乱有关。钙离子信号通路对免疫细胞的激活具有十分重要的意义，各种不同刺激信号通过复杂的信号传递途径引起胞内外钙离子浓度的变化，钙离子失去平衡，导致多种皮肤疾病的发生。以往的研究成果提示，钙离子通道异常导致的病理改变与银屑病病理变化吻合度高，那么在具有免疫功能的角质形成细胞上，当银屑病发生时，是否有钙释放激活钙通道的激活或异常，国外内外尚未见报道。.主要研究内容：.1..探讨银屑病患者的免疫异常和干预措施及其可能机制。.2..探讨HDAC6siRNA对细胞增殖和细胞凋亡的影响及分子机制.3..探讨银屑病样皮肤炎症与细胞内信号通路的关系.4..探讨钙离子通道在银屑病皮损中的状态极其干预影响.重要结果： .1.阿维A可在一定程度上逆转银屑病患者Th1和Th17的优势，这可能是阿维A治疗寻常型银屑病的机制，而Th2细胞在阿维A的治疗中没有受到影响。.2.HDAC6可以明显抑制细胞的过度增殖，促进细胞的早期凋亡，有望成为有用的分子治疗靶点。.3.beta TrcP 可以减少对kB的抑制作用，激活nF-Kb 信号转导通路。促进银屑病的发生.4.银屑病皮损区角质形成细胞细胞周期短，体外培养成活率很低，难以传代。.关键数据：.1.阿维A可以降低银屑病患者血清和皮损中的Th1,Th17和IL-17的表达，IFN-r mRNA和IL-17 mRNA在阿维A治疗8周后显著下降。.2.HDAC6 siRNA转染组中HDAC6蛋白表达显著低于未处理组和siRNA 对照组，与未处理组和siRNA对照组相比，HDAC6 siRNA转染组中SCL-1细胞的增殖明显受到抑制。HDAC6siRNA 转染组中SCL-1细胞的早期凋亡率明显高于未处理组和siRNA对照组，HDAC6 siRNA转染组中BCL-2表达明显下调，而 P21 和 Bax表达显著上升。.3咪喹莫特可以诱导小鼠产生银屑病样皮损，造模前后比较，银屑病样炎性皮肤中beta TrcP明显升高nF-kB信号转导通路激活。