芪蛭皱肺颗粒对肺泡Ⅱ型上皮细胞LPS-NFкB信号通路的调控作用研究

Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is a common respiratory disease and a serious harm to the physical and mental health of patients. COPD features the chronic inflammatory response of neutrophils, Monocyte-macrophages and CD8+T lymphocytes infiltration. However, the clinical treatment depending on the pathogenesis of COPD is not optimistic. Although anti-inflammatory therapy can reduce the frequency of acute exacerbation of COPD patients, it is difficult to stop the continuous development of inflammation..In this study, the innate immune response of rat alveolar type II epithelial cells should be induced by LPS in vivo and in vitro in order to understand its effect on the development of COPD. Activation patterns of pattern-recognition receptor TLR4 and changes of gene , protein in the conduction of LPS-TLR4-NFкB signaling pathway, and release behavior of inflammatory mediators IL-6, IL-8 and TNF-α should be study because LPS-TLR4-NFкB signaling pathway play an important role in the the innate immune response of rat alveolar type II epithelial cells. In order to understand the pharmacological mechanism of Qizhi Zhoufei Granule on prevention and treatment of LPS-induced COPD at the cellular and molecular level，effect of Qizhi Zhoufei Granule on LPS-induced rat alveolar type II epithelial cells in vivo and in vitro should be studied through the changes of gene , protein in the conduction of LPS-TLR4-NFкB signaling pathway.we hope that our research can provide some modern data for the chinese traditional medicine and some new ideas for COPD treatment.

COPD是常见的呼吸系统疾病，主要表现为以中性粒细胞、单核-巨噬细胞、CD8+T淋巴细胞浸润为主的慢性炎症反应。但抗炎为主的治疗方案，却难以终止炎症的持续发展。近期的研究提示，肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)固有免疫异常，可能在COPD发生发展中扮演着重要的角色。本研究拟采用全基因组表达谱高通量测序及免疫荧光技术等，在体内外，通过LPS诱导大鼠肺部和原代培养的ATⅡ的固有免疫反应，然后观察模式识别受体TLR4的激活模式，LPS-TLR4-NFкB信号通路的传导变化，以及炎症介质IL-6、IL-8、TNF-α等的释放行为等，试图阐明ATⅡ的固有免疫失衡在COPD发生发展中的作用。通过芪蛭皱肺颗粒干预LPS诱导的大鼠及ATⅡ，然后观察LPS-NFкB信号通路上相关基因和蛋白的表达调控，希冀在细胞分子生物学水平上，寻找芪蛭皱肺颗粒防治COPD的作用靶点。为中医药防治COPD提供现代科学依据。

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是常见的呼吸系统疾病，特别是近年来，中国大部分地区遭受了雾霾天气的影响，COPD 患者呈逐年增加的趋势。中国卫生部医政司《慢性阻塞性肺疾病治疗规范（2011 年版）》指出：COPD 的发病机制为“烟草烟雾等慢性刺激物作用于肺部，使肺部出现异常炎性反应。”COPD 主要表现为以中性粒细胞、单核-巨噬细胞、CD8+T 淋巴细胞浸润为主的慢性炎性反应。但是针对 COPD 发病机制的临床治疗结果并不令人乐观，以抗炎治疗为主的治疗方案，虽然能降低 COPD患者急性期加重的频率，却难以终止炎症的持续发展。抗炎治疗不能终止 COPD炎症的持续发展，这说明了其发病机制并不能完全用现有的认识来解释。新近的研究发现，免疫异常可能在在 COPD 慢性炎症的发生发展中起着重要的作用。.肺泡二型上皮细胞(AT-Ⅱ)在COPD发生发展中扮演者重要的角色，LPS能诱导AT-Ⅱ增生，抑制AT-Ⅱ凋亡，主要表现为BCL2,FAS,BAXB表达增加，LPS能促进AT-Ⅱ释放炎症介质IL6,IL12，推测产生这个结果的主要原因是LPS激活了LPS-CD14-NFKB信号通路，主要表现是NFKB,P38,P53,IL37等表达增加。同时LPS诱导了AT-Ⅱ-成纤维细胞转分化，TGFB 表达提高，同时胶原纤维表达增加。而芪蛭皱肺颗粒能抑制LPS诱导的AT-Ⅱ增殖，抑制AT-Ⅱ的炎症反应和转分化。.肺泡AT-Ⅱ在COPD发生和发展中具有重要的作用。AT-Ⅱ具有干细胞的特征，它能分化成肺泡一型上皮细胞，也能转分化成肺成纤维细胞。呼吸系统遭受病原微生物的侵袭，首先感知这一事件的是位于呼吸道表面的AT-Ⅱ。AT-Ⅱ表面的CD14能捕获病原微生物表面的LPS，然后通过NFKB信号通路，把感染信号转导到细胞内，引起细胞内释放炎症因子IL6,IL12等，这些趋化因子能吸引白细胞向感染部位迁移和侵润，进而杀灭病原微生物。但是，在病理状态下，NFKB信号通路反应性提高，趋化因子释放“超量”，吸引白细胞“超量”，免疫失衡，进而导致了局部组织的免疫损伤，AT-Ⅱ转分化成肺成纤维细胞，最终导致肺组织纤维化，引起气道阻塞，发展成COPD。.芪蛭皱肺颗粒能抑制LPS诱导的AT-Ⅱ的病理性增殖，同时抑制了AT-Ⅱ炎症介质的释放以及转分