肾中阴阳互根的白细胞基因表达调控网络机制研究

阴阳学说是中医理论的基石和源头，然而迄今尚未阐明其科学内涵。前期研究发现肾阴虚证、肾阳虚证具有各自不同的基因表达调控网络，提示肾中阴阳有不同的物质基础，使其表现为对立制约的关系；然而它们又有共同的基因表达调控网络，提示肾中阴阳有共同的物质基础，使其表现为互根互用的关系。本项目拟引入"阴中求阳、阳中求阴"中医治法的临床拆方研究，从基因表达调控网络角度进一步深入研究肾中阴阳的互根互用关系。首先进行不同治法的临床疗效评价，建立临床疗效数据库；其次应用基因芯片、PCR等方法检测白细胞基因表达变化，建立基因表达数据库；再次应用流式细胞仪、蛋白芯片、ELISPOT等方法检测细胞免疫、体液免疫的功能变化，建立免疫功能数据库；最后应用生物信息学方法分析"临床疗效-白细胞基因表达调控网络-免疫功能"的内在联系，以阐明肾中阴阳互根的基因表达调控网络机制，同时明确右归丸、左归丸的作用机制，为其临床应用提供依据。

阴阳学说是中医理论的基石和源头，然而迄今尚未阐明其科学内涵。前期在肾阴虚证、肾阳虚证基因表达比较分析研究中发现，它们有共同的基因表达调控网络，提示肾中阴阳有共同的物质基础，使其表现为互根互用的关系。本项目引入“阴中求阳、阳中求阴”中医治法的临床拆方研究，从基因表达调控网络角度进一步深入研究肾中阴阳的互根互用关系。采用“病证结合”方法，选取慢性肾炎、糖尿病等常见病肾阳虚证、肾阴虚证患者，按照“阴中求阳、阳中求阴”的治疗方法，对相应的中药复方（右归丸、左归丸）进行拆方研究，结果表明：右归丸治疗肾阳虚证的临床有效率（P<0.05）和症状积分（P<0.01）明显优于其单纯温肾阳药物；左归丸治疗肾阴虚证的临床有效率（P<0.05）和症状积分（P<0.01）亦显著优于其单纯滋肾阴药物。免疫功能检测显示：右归丸治疗后肾阳虚患者白细胞数量（P<0.01）、淋巴细胞转化指数（P<0.01）、NK细胞活性（P<0.01）等指标显著提高，效果明显优于其单纯温肾阳药物（P<0.05），同样左归丸亦明显优于其单纯滋肾阴药物（P<0.05），而在血清抗体、补体以及淋巴细胞亚群方面未见明显差异（P>0.05）。在基因表达方面：右归丸可使SYPL1、PHF14、ARHGAP18、RECQL、OSTF1、SEC23B等6条基因表达显著上调（P<0.01），且明显优于其单纯温肾阳药物（P<0.05）；同样，左归丸亦可显著上调上述6条基因（P<0.01），且其单纯滋肾阴药物（P<0.05）。应用肾阳虚证和肾阴虚证动物模型进一步验证了上述结果。总之，本项目首次从白细胞功能及其基因表达调控方面揭示了“阴中求阳、阳中求阴”治法的科学内涵，为“阴阳互根”理论提供了实验证据。