纳米磁性药物载体对迟发性脑血管痉挛靶向干预的基础研究

自发性蛛网膜下腔出血（SAH）85％以上是脑动脉瘤破裂所致，约70％SAH出现迟发性脑血管痉挛（DCVS），30%继发顽固性缺血性脑损害，DCVS是病情加重，致残、致死的主要原因。目前DCVS治疗方法众多，但疗效甚微。究其原因，除了尚未完全明了的机制之外，目前DCVS治疗的方法值得考虑。DCVS的发生与蛛网膜下腔出血相关，而常规经体循环给药，药物很少或难以到达。该研究根据相对肯定的发病机制，提出经脑脊液循环途径，靶向应用纳米磁性药物载体，使2、2＇-联吡啶和放射性核素131碘定向到达出血的蛛网膜下腔，并缓释2、2＇-联吡啶和 131碘。2、2＇-联吡啶螯合血红蛋白降解的 Fe++，阻断Fe++导致的DCVS的病理过程；131碘通过释放β射线，抑制血管内皮细胞和平滑肌细胞的增生和/或迁移，阻止脑血管发生病理性痉挛。该研究旨在探索新颖治疗方法或体系，为临床治疗DCVS，奠定科学的理论基础。

自发性蛛网膜下腔出血（SAH）85％为脑动脉瘤破裂所致，迟发性脑血管痉挛（DCVS）是SAH后病情加重、致残、致死的主要原因。其机制尚未完全明了。Ca++拮抗剂疗效甚微，至今仍存在争议。氧合血红蛋白（OxyHb）解离出的Fe++至今被认为是相对肯定的致DCVS物质。研究内容：1. 热处理法制备纳米磁性药物载体（MNA－DPD）；2.建立DCVS模型(200只)；3. MNA－DPD对DCVS靶向干预：具体如下：DCVS模型随机分为5组：假手术组和四个处理组（每组n=40）:DMSO组；MNA组；DPD组（2,2’-联吡啶组）和MNA－DPD组。处理组分别通过腰大池给予0.01% DMSO、MNA、DPD和MNA－DPD，MNA和MNA－DPD组分别给予梯度磁场磁导向。分别在第 1、3、7、14天进行行为学和神经功能评估，并行血浆ET、NO和丙二醛（MDA）测定。然后取基底动脉标本进行HE和普鲁士蓝染色、免疫组织化学、Western blot观察基底动脉PCNA、VEGF、c-Myc和P53蛋白表达水平以及TUNEL检测。结果表明：第3天和第7天时MNA组、DMSO组和DPD组表现为明显的行为异常和神经功能障碍，MNA –DPD组表现较轻微，与其他组比较具有显著差异（P＜0.05）；第3、7天MNA组、DMSO组和DPD组血浆ET、MDA浓度明显增高。而MNA –DPD组血浆ET、MDA浓度稍有变化，与其他组比较具有显著差异（P＜0.01）。第3、7天MNA组、DMSO组和DPD组血浆NO浓度明显降低，而MNA–DPD组血浆NO浓度基本正常，与其他组比较具有显著性差异（P＜0.01）。HE和普鲁士蓝染色显示：DMSO组、MNA组基底动脉明显痉挛，DPD组轻度痉挛， MNA-DPD组基底动脉基本正常的形态。免疫组化显示：第3天时在DMSO组、DPD组和MNA组PCNA、P53、c-Myc、VEGF蛋白呈高表达，MNA –DPD组呈低表达（P＜0.05）。 TUNEL显示：在MNA-DPD组TUNEL细胞阳性率明显较低，在其他组中TUNEL细胞阳性率较高（P＜0.05）。研究表明：利用磁导向将纳米磁性药物载体靶向聚集于DCVS部位，并缓释药物，增加DPD的有效浓度。DPD为铁螯合剂，对Fe++具有的高度亲和力，有效地螯合OxyHb解离出的Fe++，最终阻止脑血管痉挛。