牛磺胆酸对小鼠免疫细胞功能的调控机制研究

牛磺胆酸（Taurocholate Acid，TCA）是广泛存在于动物胆汁中的一种结合型胆汁酸，研究证实从牛羊胆汁中分离的牛磺胆酸具有显著的抑菌、抗炎、利胆、降血压等作用，同时对机体的免疫功能具有显著的调控作用，但其免疫调控机理尚未清楚。本研究拟以免疫抑制小鼠为模型，采用ELISA、流式细胞术、Western blot、荧光定量RT-PCR技术和TUNEL等方法，研究牛磺胆酸对小鼠免疫功能的影响；分析小鼠免疫细胞的活性变化、小鼠免疫细胞中IL-1β、TNF-α和IL-2基因及蛋白表达量、免疫细胞凋亡过程中相关因子的变化，旨在揭示牛磺胆酸抗炎免疫作用的分子调控机制，为其将来开发成新的具有抗炎活性和免疫调节作用的药物提供理论和实验基础。

结题摘要.本研究旨在阐明TCA对小鼠免疫细胞功能的调控机制。通过分析TCA对小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β和TNF-α的分泌量、及其增殖活性的影响，研究TCA对小鼠腹腔巨噬细胞免疫调控的影响；进一步分析TCA对T、B淋巴细胞和脾淋巴细胞分泌免疫调节因子IgG、IL-1β、IL-2和TNF-α含量的影响，研究TCA对T、B淋巴细胞及脾淋巴细胞的影响；通过分析TCA对胸腺细胞凋亡率、Caspase-9和Caspase-3活性的影响，研究TCA对胸腺细胞凋亡的影响；分别从基因和蛋白水平研究TCA对IL-1β、TNF-α含量的影响，研究TCA对巨噬细胞产生的抗炎免疫调节作用的相关信号通路PKC-MAPK-ERK1/2的影响。揭示了TCA作为动物的内源性物质，在体内发挥抗炎免疫调节的作用机制。结果表明，TCA能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率，可显著提高体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞IL-1β和TNF-α的分泌量，可显著提高小鼠脾淋巴细胞的增殖活性。TCA可提高CD4+/CD8+的比值，恢复被抑制表达的TNF-α、IL-1β和IgG的含量；TCA可增加脾淋巴细胞分泌IL-2；高剂量TCA可提高caspase-3的活化程度，诱导小鼠胸腺细胞及腹腔巨噬细胞凋亡；TCA可通过PKC-MAPK-ERK1/2通路参与巨噬细胞的抗炎免疫调节作用。结论：TCA可通过增强免疫细胞的吞噬作用、调控免疫细胞增殖活性并诱导其凋亡，TCA可通过PKC-MAPK-ERK1/2信号通路双向调节TNF-α和IL-β的含量产生抗炎免疫调节作用。