基于抑制Streptomyces 85E气生菌丝生成从照山白中寻找新颖蛋白激酶抑制剂先导化合物

细胞信号转导中的蛋白激酶已经成为非常热门的抗癌药物分子靶点之一。近年国外发现链霉菌Streptomyces 85E对蛋白激酶抑制剂非常敏感，其气生菌丝的生成需要蛋白激酶级联的活性。基于抑制Streptomyces 85E气生菌丝生成的生物活性测试方法(HFIB)已经成为蛋白激酶抑制剂的有效初筛模型，并用于海洋生物和微生物的活性筛选。本项目拟首次采用这种生物活性测试方法作为初筛模型从我国传统中草药照山白中寻找新颖的蛋白激酶抑制剂，通过HFIB活性指导分离，利用现代波谱方法并结合化学方法鉴定化合物结构，筛选对Streptomyces 85E菌丝生成、人乳腺癌细胞MCF-7增殖和丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK）的抑制活性，并通过结构改造制备衍生物探讨可能的结构-活性关系，从而为一步的研究提供依据，以期发展成为新颖的蛋白激酶抑制剂先导化合物。

基于抑制Streptomyces 85E气生菌丝的生物活性实验（HFIB）是寻找蛋白酶抑制剂先导化合物的一种前期初步方法。本项目前期研究发现照山白枝叶粗提取物对Streptomyces 85E气生菌丝有强烈的抑制作用。为了寻找其中的活性成分，本项目对照山白的枝叶和花的化学成分进行了系统研究。从照山白枝叶中分离并鉴定了82个化合物，包括25个倍半萜、降倍半萜及其糖苷，36个二萜及二萜糖苷和21个其他类型的化合物。其中一个化合物为新骨架类型的二萜，另外还有26个新化合物。从照山白的花中分离得到了45个化合物，其中新化合物9个。利用HFIB活性筛选方法，发现了一个具有显著抑制Streptomyces 85E气生菌丝的倍半萜类化合物，在20 μg/disc浓度下抑菌圈为2.3 cm，最低抑制浓度为1.25 μg/disc，是一个潜在的蛋白激酶抑制剂先导化合物。此外，对所得的化合物进行了抗肿瘤活性、11β-HSD1酶抑制活性、体外免疫抑制活性筛选。结果显示两个倍半萜类化合物对HL-60，SMMC-7721，A-549，MCF-7，SW480肿瘤细胞有一定的细胞毒性，三个三萜类化合物对11β-HSD1酶有显著的抑制活性。为进一步发现照山白中的活性成分奠定了基础，为进一步开发利用照山白提供了科学依据。相关研究结果多次在国内外举办的学术会议上交流，并做大会报告。部分成果发表在了Organic Letters（2013, 15 (12), 3094–3097）、中草药、中国科技论文在线上，其余结果已整理出论文，将分别投稿到Phytochemistry、Journal of Organic Chemistry等期刊上。