Ghrelin抑制机械通气肺损伤炎症的内源性防御机制研究

肾素-血管紧张素系统(RAS)参与的炎症反应是导致机械通气肺损伤(VILI)最主要的原因之一，本项目在我们前期研究发现Ghrelin能有效抑制炎症反应的基础上，推测并拟证明"Ghrelin可能通过拮抗RAS，抑制炎症反应，是机体抗VILI的内源性防御体系"的假说。拟于呼吸机损伤大鼠和大鼠原代II型肺泡上皮细胞机械通气损伤模型上，通过SiRNA干扰、基因过表达质粒、抑制剂和激动剂，结合Real-Time PCR、Western-blot、ELISA、放射免疫方法、受体Binding实验、EMSA等检测方法，研究内源性Ghrelin抗VILI炎症作用，进一步探讨内源性Ghrelin对RAS的拮抗作用及其调控机制，以论证Ghrelin是机体VILI炎症的重要内源性防御因子的假说；并初步探讨其抗VILI炎症的细胞分子机制，为机械通气损伤的分子机制研究奠定理论基础，并为临床防治VILI开拓新思路。

在国家自然基金资助下，课题组从动物实验和细胞实验方面对Ghrelin抗VILI炎症的作用机制进行了研究。研究结果显示：使用Ghrelin处理AngII构建的细胞炎症模型中发现Ghrelin对AngII诱导的炎性因子的表达没有明显的抑制作用。提示我们：Ghrelin可能不是通过抑制AngII诱导炎性因子的表达来对机械通气肺损伤起保护作用，可能从凋亡和氧化应激方面发挥作用；基于上述的研究结果，课题组利用H2O2氧化损伤肺泡上皮细胞致炎，研究Ghrelin的抗炎作用，结果表明Ghrelin对肺泡上皮细胞氧化损伤炎症具有抑制作用，并可能通过NF-κB/ IκB-α途径实现作用。进一步研究发现，Ghrelin需要通过与Ghrelin受体结合才能激活下游的作用信号，发挥抗炎作用。Ghrelin 可以通过抑制NF-κB活性，降低A549细胞中IL-8的水平，从而抑制氧化应激导致肺泡上皮细胞的炎症。同时课题组研究Ghrelin对香烟诱导的气道的炎症反应的作用分子机制。发现Ghrelin可以抑制熏烟所致的大鼠的气道炎症损伤和抑制香烟提取物（CSE）诱导的炎症损伤。进一步信号通路机制方面的研究结果显示：Ghrelin能够抑制CSE诱导的NF-KB通路的激活，表现为抑制p65 和IKKα/β的磷酸化，并减少 IκB-α 的降解。进一步研究发现，Ghrelin预处理对香烟刺激的16-HBE细胞内ROS的产量的增加具有明显的抑制作用。可以推测Ghrelin通过抑制氧化应激来抑制IL-6的表达的，达到了抑制炎症损伤的作用。.在本国家自然基金课题资助下，课题组还关注于炎症性疾病分子机制研究，如类风湿性关节炎、肺结核感染、COPD等。主要从研究这些疾病遗传易感基金入手，探索中国人群炎症相关疾病可能存在的特有相关的易感基因，研究结果显示：炎性细胞因子IL-10、IL-18和SMAD信号通路中等可能存在类风湿性关节炎、肺结核感染、COPD等疾病相关的易感基因。 在本基金资助下，课题组共向国际会议投稿9篇，均被接收为大会摘要，其中有1篇被评为2011AACC杰出摘要奖，有3人次参加国际学术交流会议，9人次参加国内重要学术会议，指导研究生连续2次获四川省检验学术会优秀论文一等奖。培养3名硕士研究毕业。 获国家发明专利2项。课题负责人（作为第一作者或通讯作者）发表相关文章有30余篇，其中SCI收录27篇。