TRAIL靶向肿瘤干细胞治疗胰腺癌的耐药性机制研究

肿瘤干细胞概念的提出，为肿瘤发生机制的认识提供了一条新思路。已有研究提示，肿瘤干细胞正是导致肿瘤耐药的细胞。本课题以肿瘤干细胞为研究对象，探讨TRAIL在胰腺癌治疗中的耐药性作用机制。以CD44和CD24标记，流式细胞仪分选出的CD44+/CD24+亚细胞群，具有肿瘤干细胞的初步特征。基于蛋白质组学研究平台，寻找TRAIL药敏株与耐药株胰腺癌肿瘤干细胞中的差异蛋白。之后，采用Realtime PCR和Western blot方法从基因和蛋白水平进行基因差异表达的验证。进一步的机制研究通过基因导入和RNA干扰，观察差异基因上调或下调对细胞凋亡率，基因型和表型的影响；此外还从多耐药基因表达情况，细胞膜离子流改变以及相互作用蛋白方面深入探讨了肿瘤干细胞中可能影响细胞耐药性的因素间的内在联系。期望能够找到新的关键靶标因子，为肿瘤细胞耐药性机理的阐明提供依据，并为肿瘤靶向治疗提供新的靶点和治疗方法。

肿瘤干细胞概念的提出，为肿瘤发生机制的认识提供了一条新思路。已有研究提示，肿瘤干细胞正是导致肿瘤耐药的细胞。本课题以肿瘤干细胞为研究对象，探讨TRAIL在胰腺癌治疗中的耐药性作用机制。以CD133标记，磁珠分选结合流式细胞仪检测CD133+亚细胞群，通过克隆形成，移植瘤等实验鉴定分选细胞的“干性”。 进一步的机制研究从基因和蛋白水平对多耐药基因表达情况，相互作用分子的表达方面深入探讨了肿瘤干细胞中可能影响细胞耐药性的因素间的内在联系，寻找影响耐药的关键靶标因子。研究发现ABC转运蛋白超家族成员蛋白与CD133+肿瘤细胞亚群的耐药性密切相关。通过进一步实验证明TRAIL耐药与其诱骗受体的表达和促凋亡蛋白cflip的表达无关，而与死亡受体的关系密切。本项研究中，寻找到几个与肿瘤干细胞耐药密切相关的关键靶标因子，为肿瘤细胞耐药性机理的阐明奠定基础，为肿瘤靶向治疗提供新的靶点和治疗方法。 同时，课题还探讨了Notch基因的表达与胰腺癌肿瘤干细胞间的相关，期望能够为后续深入开展肿瘤细胞的耐药逆转研究提供依据。以上相关研究结果已经引用本基金发表SCI论文2篇，核心期刊论文4篇，其它待投SCI论文1篇。