慢性膀胱炎症与雌激素受体相关性及二丁二仙汤防治

该研究为进一步探讨雌激素、雌激素受体以及慢性膀胱炎症之间的关系，以及二丁二仙汤对慢性膀胱炎的防治，应用不同月龄大鼠、采用膀胱内多次灌注大肠杆菌制作的慢性膀胱炎的动物模型，采用放射免疫法检测血清雌二醇水平，应用免疫组化、RT-PCR，观察年轻或老年、或合并慢性膀胱炎的大鼠雌激素受体/NFKB mRNA在泌尿道组织中表达的改变，来探讨血、尿雌激素水平、膀胱组织雌激素受体亚型表达量与膀胱炎的相关性。并应用老年大鼠慢性膀胱炎动物模型，进行二丁二仙汤防治慢性膀胱炎的药效学实验研究，并观察二丁二仙汤及其拆方是否具有调节雌性大鼠血清雌二醇水平及膀胱组织中不同雌激素受体亚型表达的作用，从而探讨二丁二仙汤治疗慢性膀胱炎的内分泌机制。

目的：研究膀胱组织中不同亚型雌激素受体、NF-ΚB表达和慢性膀胱炎之间的关系。并观察中药二丁二仙汤是否具有调节雌性大鼠血清雌激素水平和膀胱组织不同亚型雌激素受体表达的作用，预防与缓解慢性炎症的作用，从而探讨二丁二仙汤防治慢性膀胱炎机制。方法：（1）应用3月龄和13月龄大鼠，采用膀胱内多次灌注大肠杆菌，制作慢性膀胱炎动物模型方法，采血检测血清雌二醇水平，膀胱组织行雌激素受体免疫组化，提取膀胱总RNA，运用Real-Time PCR检测雌激素受体、NF-ΚB mRNA表达改变。（2）应用18月龄老年大鼠慢性膀胱炎动物模型，分为8组，检测各组血清雌二醇水平，膀胱组织行雌激素受体免疫组化，提取膀胱总RNA，运用Real-Time PCR检测雌激素受体、NF-ΚB mRNA表达改变。（3）应用去势大鼠模型，分为6组，去势术后，给药8周后予膀胱灌注大肠杆菌2次。检测各组血清雌二醇水平，膀胱雌激素受体ERα和ERβ mRNA表达变化，运用Western Blot方法检测膀胱TNF-α、IKBα、P- IKBα蛋白表达变化。结果：（1）雌激素及其受体与慢性膀胱炎关系研究：3月龄大鼠血清雌二醇水平与13月龄大鼠血清雌二醇水平比较差别无统计学意义。（2）二丁二仙汤治疗慢性膀胱炎的作用及机制研究：二仙汤组与二丁二仙汤组与正常老年组血清雌二醇水平上升比较明显，但由于个体变化较大，差别无统计学意义。膀胱HE染色提示，炎症情况以模型组较重，其他各组均有不同程度减轻。与模型组比较，二丁汤、二仙汤、二丁二仙汤组大鼠膀胱雌激素受体α和βmRNA表达下降明显与模型组比较，氟哌酸+补佳乐组、二仙汤组、二丁二仙汤组大鼠膀胱NF-ΚB mRNA下降。（3）二丁二仙汤预防膀胱炎症的作用及机制研究：二丁二仙汤组、雌激素组、他莫昔芬组血清雌二醇水平较去势组升。膀胱HE染色情况，模型组重度急性炎症表现，三组药物组均为轻度炎症表现。二丁二仙汤组、雌激素组、他莫昔芬组膀胱雌激素受体β β mRNA较模型组有上升。二丁二仙汤组、雌激素组、他莫昔芬组膀胱TNF-α蛋白和磷酸化IKBα蛋白表达下降。结论：与雌激素、他莫西芬比较，中药二丁二仙汤能预防泌尿道感染发生，其机制可能与上调血清雌激素，局部上调膀胱雌激素受体β，抑制TNF-α产生和IKBα磷酸化有关。