类固醇激素合成急性调节蛋白（StAR）在血管内皮细胞脂质代谢平衡中的作用研究

脂质代谢紊乱在动脉粥样硬化形成过程中具有重要作用。类固醇激素合成急性调节蛋白（StAR）介导胆固醇由线粒体外膜转入线粒体内膜，对类固醇激素合成和脂质代谢的调节具有重要作用。我们初步的实验结果首次显示StAR表达于血管内皮细胞中，并受胆固醇、LDL、25-羟基胆固醇等脂类物质的调节，因此推测在内皮细胞中StAR的表达与脂质代谢有关，通过促进胆固醇转运至线粒体增加调节性氧化固醇的含量，以维持内皮细胞内胆固醇代谢平衡。本课题拟在原代培养的人脐静脉内皮细胞，利用腺病毒转染、RNA干扰等技术在分子水平、细胞水平研究StAR在血管内皮细胞胆固醇代谢，阐明StAR通过促进胆固醇转运至线粒体生成调节性氧化固醇，进一步激活核内肝X受体α，最终促进胆固醇逆转运蛋白ABCA1和ABCG1的表达，促进胆固醇自细胞内流出。本研究结果将为动脉粥样硬化的防治提供新的理论基础和实验依据。

脂质代谢紊乱是动脉粥样硬化发生发展过程中重要危险因子，因此增加粥样斑块形成相关细胞内胆固醇的排出和逆向转运已成为抗动脉粥样硬化的研究热点。其中内皮细胞是组织动脉粥样硬化斑块的主要细胞之一，研究内皮细胞中脂质代谢平衡的调节，对于阐明动脉粥样硬化发病机制及防治有指导意义。类固醇激素合成急性调节蛋白（StAR）介导胆固醇由线粒体外膜转入线粒体内膜，对类固醇激素合成和脂质代谢的调节具有重要作用。我们初步的实验结果显示StAR表达于血管内皮细胞中，并受到脂类物质的调节，推测在内皮细胞中StAR的表达与脂质代谢有关，以维持内皮细胞内胆固醇代谢平衡。.本课题中，首先在体外构建了含有人StAR基因全长cDNA的腺病毒表达载体，在小鼠微血管内皮细胞中成功过表达StAR后，细胞内胆固醇逆向转运蛋白ABCA1和ABCG1基因和蛋白表达水平显著升高，提示StAR可通过促进胆固醇逆向转运减少细胞内胆固醇的水平。进一步在原代培养的主动脉内皮细胞中，利用腺病毒转染的方法过表达StAR后，结果显示参与脂质代谢的关键基因，FAS，ACC1，HMGR，LDLR，SREBP-2 mRNA表达明显降低，同时细胞内胆固醇和游离脂肪酸明显减少。其次， StAR过表达后，用软脂酸刺激细胞， IL-1、TNF、IL-6、VCAM-1基因水平明显降低，同时细胞培养上清中IL-1、IL-6以及TNF含量也显著降低；其作用是通过抑制软脂酸引起NFB的核转位发挥的；另外，在大鼠主动脉内皮细胞中成功转染StAR 可改善由软脂酸导致的细胞NO合成的减少，其作用是通过增加p-Akt/p-eNOS/NO通路的活性来实现的。最后，为观察StAR在体内的作用，本研究以动脉粥样硬化小鼠模型——apoE基因敲除小鼠（apoE-/-）为研究对象，比较了apoE-/-小鼠和正常对照小鼠肝脏内StAR基因及蛋白表达的差异，发现apoE-/-小鼠因为血脂水平的提高，StAR基因和蛋白表达水平呈现先增高后降低的趋势，而正常小鼠体内StAR基因和蛋白表达水平随年龄增长逐渐下降，提示StAR的表达受体内血脂水平的影响，且有可能与动脉粥样硬化的发生发展存在联系。.本研究结果证实StAR过表达可以促进内皮细胞胆固醇逆向转运蛋白的表达，降低细胞内脂质水平，抑制由软脂酸引起的炎症反应以及NO合成的减少，保护内皮功能。将为动脉粥样硬化的防治提供新