云南民族民间药用昆虫喙尾琵琶甲抗肿瘤活性物质基础研究

The medicinal insect, Blaps rynchopetera Fairmaire, as material of Yi traditional medicine is broadly applied to the treatment of fever, cough, gastritis, boils, and tumors. It was found to possess the inhibitory effect against tumor cells, and its petroleum ether extract demonstrated potent cytotoxicity in our previous investigation..We therefore proposed to further systematically study on its antitumor substance and mechnism of action. The main approaches in the research include: (1) bio-guided extraction for the determination of antitumor effective part of the insect; (2) pure compounds, peptides included, isolation with the applications of column chromatography, HPLC, electrophoresis, gel and molecular sieve filtration chromatography; (3) fingerprinting study on bioactive part and peptides; (4) employing spectrometries as UV, IR, NMR, MS and techniques like HPLC-NMR combination for the structure elucidations of the molecules, including polypeptides/glycopeptides; (5) evaluating the cytotoxicities of isolated compounds with MTT bioassays; (6) assessing the antitumor effects of bioactive part and isolated compounds on S180-bearing mice and other in vivo models; (7) preliminarily investigating the antitumor mechnism of action for bioactive part as well as isolated compounds..The expected results derived from the proposed advance study on B. rynchopetera will be able to enrich pharmaceutical researches, to better utilize Yunnan local special resources, and to provide material and scientific bases for the applications of the medicinal insect.

喙尾琵琶甲（Blaps rynchopetera Fairmaire）为传统彝药药材，广泛用于治疗发烧、咳嗽、胃炎、疔疮、肿瘤等。前期研究发现该昆虫提取物具有很好的肿瘤细胞生长抑制作用，其石油醚部位对K562白血病细胞株等有显著的细胞毒活性。.本课题将进一步对其进行系统的抗肿瘤活性及物质基础研究，内容包括：(1)通过活性追踪指导的系统提取分离确定细胞毒活性部位；(2)采用柱层析、制备HPLC、电泳、凝胶过滤等技术，获得包括肽类的单体化合物；(3)对活性部位及多肽组分进行指纹图谱研究；(4)采用四大波谱及多种联用技术确定单体结构；(5)采用MTT法评价有效部位及单体化合物的细胞毒活性；(6)采用S180荷瘤小鼠等模型对活性部位和单体进行抗肿瘤药效评价；(7)初步探讨其抗癌作用机制。.对喙尾琵琶甲的深入研究，可以丰富昆虫药物研究资料、更好的利用云南特色资源，并为民间应用提供物质基础及科学依据。

喙尾琵琶甲（Blaps rynchopetera Fairmaire）是云南彝族长期广泛使用的昆虫药物，具有清热解毒、活血化瘀、祛风定痛、软坚散结之功效。本项目对该昆虫药物的物质基础及细胞生长抑制活性、抗肿瘤活性及其可能机制方面开展研究。项目按计划执行，基本完成计划研究内容，达到预期研究目标；研究过程中根据活性筛选结果对内容和方向有所调整和扩充，对个别新发现活性进行了追踪和深入研究。.首先，按计划比较系统的完成了该昆虫的物质基础研究，包括系统分离鉴定70多个单体化合物，主要为多酚类，环肽类、杂环生物碱类、有机酸类等，其中7个为新化合物；采用GC-MS鉴定了脂溶性部位的60多个挥发性组分及刺激分泌物中的6个组分；通过HPLC鉴定了多糖中单糖组成及含量；通过原子吸收方法，鉴定其中的微量元素及含量；采用紫外—可见分光光度发测定提取物、分泌物中酚类物质的含量等。.其次，完成活性部位的体内验证，急性毒性试验及肝损伤考察。.第三，对分离部位和部分单体物质进行了体外的细胞毒活性、免疫调节活性、抗氧化活性、抗炎活性等肿瘤治疗相关活性，及其他抗菌活性、促牙组织再生活性、α-葡萄糖苷酶的抑制活性等多种具有开发潜能活性的体外筛选。其中细胞毒活性方面，除化合物60外，其他活性均不明显，未进行进一步的药效考察；对免疫调节活性测试分析发现，该昆虫提取物确实具有较好的免疫调节作用，这与前期研究中单独给药效果不明显，而前期基础研究中，与美洲大蠊提取物联合给药药效较好的结果相一致。.第四，在其他活性筛选中，发现提取物及部分单体有很好的促进牙组织生长的活性。相关活性的进一步深入研究，已由云南省第一人民医院的李启艳教授，获得2016年的国家基金云南省地区基金项目的资助（云南特色药物喙尾琵琶甲成骨与抗炎作用研究，No.81660186）及云南省科技厅重点项目的资助（云南特色虫源性药物成骨和抗炎作用研究）。.研究结果共完成5篇毕业论文，发表相关论文8篇（部分未标注基金号），申请专利1项。尚有大量数据在整理中，相关专利和论文将后续逐渐发表。