凤尾草拮抗雷公藤甲素毒性的物质基础及其减毒作用机制研究

雷公藤甲素是国内外公认具有肯定疗效的治疗类风湿性关节炎等自身免疫功能亢进性疾病的药物，但是其毒副作用大大限制了它的临床应用。文献报道民间有用凤尾草解误食雷公藤中毒的实例，前期研究首次发现凤尾草与雷公藤甲素联合用药可显著降低雷公藤甲素的毒性，特别是肝毒性，同时基本保持其免疫抑制活性。本项目在此基础上，通过建立雷公藤甲素致小鼠肝损伤模型，利用肝功能和组织形态学等评价指标，追踪分离鉴定凤尾草中拮抗雷公藤甲素毒性的有效成分，并从凤尾草对雷公藤甲素的肝脏毒性影响方面，研究凤尾草减毒有效成分对雷公藤甲素的减毒作用机制，阐明凤尾草拮抗雷公藤甲素毒性的物质基础及其减毒作用机制，为提高雷公藤甲素临床应用的安全性、拓展凤尾草药用用途以及进一步研究开发雷公藤甲素和凤尾草新的复方中药奠定基础。

摘要：类风湿关节炎（RA）是严重危害人民健康的10类（种）重大疾病之一，该病发病率高，危害严重。雷公藤甲素是目前治疗RA等自身免疫性疾病最有效的中药成分之一，但是它的毒副作用大大限制了其临床应用。我们研究发现凤尾草对雷公藤甲素有减毒持效作用。通过本项目研究阐明凤尾草拮抗雷公藤甲素毒性的物质基础及其作用机制，为提高雷公藤甲素和雷公藤类药物临床应用的安全性及进一步研发雷公藤类药物与凤尾草的复方新药奠定基础。本项目研究了凤尾草化学成分，确定了凤尾草拮抗雷公藤甲素毒性的有效部位为水部位的总黄酮，并从中分得单体化合物31个，其中新化合物4个，确定了主要有效成分为忍冬苷和野漆树苷。研究了凤尾草总黄酮、忍冬苷和野漆树苷对雷公藤甲素免疫抑制活性和治疗佐剂性关节炎疗效的影响，结果表明其对雷公藤甲素疗效基本不影响。从而阐明了凤尾草拮抗雷公藤甲素毒性的物质基础。完成了凤尾草总黄酮、忍冬苷和野漆树苷对雷公藤甲素致急性肝损伤小鼠肝组织结构、生化指标和肝细胞凋亡的影响研究。结果表明忍冬苷和野漆树苷能有效降低雷公藤甲素肝损伤模型血清AST、ALT水平，显著提高SOD、GST、GSH-Px水平，降低MDA水平，并能明显改善肝组织的病理学损伤。忍冬苷和野漆树苷还能显著降低活性氧的产量，有效提高线粒体膜电位，明显降低肝细胞晚期凋亡率，对肝细胞早期凋亡率也有一定降低作用。忍冬苷和野漆树苷抗过氧化、清除自由基以及降低雷公藤甲素诱导的细胞凋亡是其拮抗雷公藤甲素毒性的主要机制。从而基本阐明了凤尾草有效成分忍冬苷和野漆树苷对雷公藤甲素减毒作用机制。为解决来源问题，开发了有效成分忍冬苷和野漆树苷的半合成方法。雷公藤等含雷公藤甲素药物可通过与忍冬苷、野漆树苷和凤尾草总黄酮配伍降低毒性，从而提高其临床应用的安全性。凤尾草总黄酮、忍冬苷和野漆树苷可作为保肝降酶新药值得进一步研发。本项目达到了预期研究目标并取得了较理想的研究成果。培养硕士研究生4名；发表论文10篇，其中SCI期刊论文2篇，核心期刊论文6篇；录用核心期刊论文4篇；申请发明专利6项，其中授权专利2项。