人参皂苷Rb3的类雌激素样血管保护效应研究

借助体内药物靶点识别及重组雌激素受体效应片段和荧光素酶报告基因转染人卵巢癌细胞株建立实验体系，暴露西洋参茎叶总皂苷（PQS）入血成分GRd、GRb3、GRb2和GRc，证实GRb3具有强雌激素激动效应，结合PQS药理研究基础，推测GRb3具有类雌激素样血管保护作用。本项目拟纳入围绝经期冠心病病人，观察PQS对血管弹性、内膜厚度等动脉粥样硬化情况及血清雌激素水平的影响；借助去卵巢ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型，观察GRb3对动脉粥样硬化血管内皮完整性、血管内皮舒缩状态、动脉粥样硬化程度、斑块稳定性以及血管壁和血清雌激素、27-HC、NF-κB、AP-1、ICAM-1、E-Selectin、 eNOS等表达水平的影响；借助内皮细胞损伤模型，观察GRb3对血管内皮细胞活性和ERK、MAPK、PI3K/AKT等信号转导的调控以及对NO生成与释放的影响， 探索GRb3的血管保护效应及作用机制。

流行病学研究表明，心血管系统疾病的发病率存在性别差异，绝经前女性心血管病的发病率低于男性，但绝经后男女无差异。提示雌激素具有血管保护作用,因此雌激素替代疗法一时间成为业界的研究热点。由于雌激素替代治疗能够引发乳腺癌，子宫内膜癌，中风，深静脉血栓等副反应而被叫停，心血管界迫切需要具有类雌激素作用而本身副反应较少的植物类雌激素参与治疗。本研究通过观察绝经后女性冠心病患者雌二醇水平，并给予心悦胶囊（西洋参茎叶总皂苷）干预发现，绝经后女性冠心病患者雌二醇水平明显下降，西洋参茎叶总皂苷有提高雌二醇水平趋势，且对血管具有保护作用，其机制除了能够改善绝经后冠心病患者血脂代谢紊乱，主要还表现在对抗过氧化、抑制炎症反应以及调节血管舒缩状态三个方面。为探索西洋参茎叶总皂苷其主要药效成份人参皂苷Rb3的类雌激素样血管保护效应，本课题组进行了体内外实验验证。体内实验中，借助去势ApoE-/-小鼠模型证实了西洋参茎叶总皂苷具有提高血清17β雌二醇水平、改善脂质代谢紊乱、减轻氧化应激反应及抑制炎症反应及促进Akt蛋白磷酸化等作用，该作用可以被雌激素受体阻断剂阻断，说明西洋参茎叶总皂苷的上述作用主要通过雌激素与受体结合途径实现的。体外细胞实验中，借助氧化低密度脂蛋白干预人脐静脉内皮细胞建立内皮损伤模型，给予人参皂苷和雌激素后，证实人参皂苷Rb3表现的保护作用与雌二醇类似，二者均可抑制内皮细胞氧化应激、炎症反应激活、ET-1和NO过度释放及细胞凋亡，并可降低Akt、ERK1/2蛋白磷酸化水平，这些作用可以被雌激素受体抑制剂阻断，说明人参皂苷Rb3可通过与雌激素受体结合途径实现血管内皮细胞的保护作用。本课题首次证实PQS及人参皂苷Rb3具有类雌激素作用，为PQS及Rb3，作为一种植物类雌激素防治绝经后冠心病的临床应用提供实验和临床依据。