核糖体蛋白L11调控突变型p53的分子机制及其在卵巢癌发展和恶化中的功能研究

Ovarian cancer is one of the prevalent malignancies of the female reproductive organs while the mortality of this cancer is the highest among all the tumors in the female reproductive system. p53 is found to be mutated in 96~99% of high-grade serous ovarian cancer. However, it remains elusive whether and how mutant p53 is involved in the development and progression of ovarian malignancy. Over the last decade, our group and others have shown that a number of ribosomal proteins play a role in tumorigenesis by modulating wild-type p53 activity. Given the fact that p53 is highly mutated in the high-grade ovarian cancer, it is a critically important and interesting question whether ribosomal proteins regulate mutant p53 in the late-stage ovarian cancer. Hence, in this study, we will explore whether and how ribosomal protein L11 regulates mutant p53 activity at both mRNA and protein level, identify and characterize novel mutant p53 target genes by ChIP-chip assay, and demonstrate the function of L11-mutant p53-target gene cascade in the progression and metastasis of ovarian cancer using ovarian cancer cell system and SCID mouse tumor model. We will also elucidate the molecular basis of mutant p53-induced drug resistance and provide a clue to the discovery and application of potential druggable targets. Taken together, our study is of great importance to the treatment of late-stage ovarian cancer.

卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，死亡率高居妇科肿瘤首位。p53在高级别浆液性卵巢癌中的突变率高达96~99%。然而，对突变型p53在卵巢癌中功能及作用机制的研究鲜有报道。近年来，包括我们研究工作在内的大量证据显示核糖体蛋白可以通过调控野生型p53活性控制肿瘤发生和发展。但是，由于高级别卵巢癌中p53的高突变率，核糖体蛋白如何调控突变型p53才是晚期卵巢癌研究中的关键科学问题。本项目将首次探索核糖体蛋白L11在mRNA和蛋白质水平调控突变型p53的分子机制，采用染色质免疫共沉淀-芯片联用方法鉴定新的突变型p53靶基因，并利用卵巢癌细胞系和免疫缺陷小鼠肿瘤模型阐明L11-突变型p53-下游靶基因信号途径在卵巢癌恶化和转移中的作用，为临床上如何克服突变型p53诱导肿瘤细胞产生抗药性提供分子基础，为发现和利用术后辅助治疗的新靶点提供线索，对指导晚期卵巢癌临床治疗有非常重要的意义。

卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，死亡率高居妇科肿瘤首位。p53在高级别浆液性卵巢癌中的突变率高达96~99%。然而，对突变型p53在卵巢癌中功能及作用机制的研究鲜有报道。近年来，包括我们研究工作在内的大量证据显示核糖体蛋白可以通过调控野生型p53活性控制肿瘤发生和发展。但是，由于高级别卵巢癌中p53的高突变率，核糖体蛋白如何调控突变型p53才是晚期卵巢癌研究中的关键科学问题。本项目首次阐明了核糖体蛋白L11可在mRNA和蛋白质水平促进突变型p53的稳定性，进而上调突变型p53靶基因表达。我们首先通过RNA-Pull down和RNA免疫共沉淀实验等证实了L11可与突变型p53 mRNA相互作用，并确定了其相互作用的关键序列。通过检测RNA半衰期发现敲低L11可以促进突变型p53 mRNA降解。通过蛋白质免疫共沉淀证实L11可与多种p53突变体相互作用。蛋白质半衰期实验证实L11也能够影响突变型p53蛋白稳定性。我们进一步利用卵巢癌细胞系和免疫缺陷小鼠肿瘤模型阐明了L11-突变型p53-下游靶基因信号途径在卵巢癌恶化和转移中的作用。我们的研究为临床上如何克服突变型p53诱导肿瘤细胞产生抗药性提供分子基础，为发现和利用术后辅助治疗的新靶点提供线索，对指导晚期卵巢癌临床治疗有非常重要的意义。