富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白SPARC在胃癌细胞中的表达和调控

SPARC(Secreted Protein，Acidic and Rich in Cysteine)，即富含半胱氨酸(Cys)的酸性分泌蛋白，是一种细胞外基质糖蛋白。它参与组织重建、形态生成、细胞迁移和增殖，调节机体的生理和病理过程。SPARC在某些恶性肿瘤中可有异常表达，在肿瘤的发生过程中的各个阶段发挥着作用。SPARC在胃癌发生发展中的作用尚缺乏研究。因此，本课题：①采用免疫组化和显微切割技术研究SPARC在胃癌组织中的表达,及其与胃癌临床病理特征的关系。②研究SPARC在胃癌细胞系中的表达，采用siRNA技术"沉默"SPARC基因在胃癌细胞中的表达。观察抑制SPARC对胃癌细胞增殖、细胞周期、侵袭力和体外成瘤的影响。③研究SPARC与成纤维生长因子（FGFs）的相互关联和作用，研究MAPK信号通路对SPARC转录的影响，探讨SPARC在胃癌细胞中的调控机制。

本课题组严格按照相关规定有计划使用经费，按时完成年度计划和研究内容。经过三年努力工作，基本实现了预期的研究目标并取得了一定的研究成果。简述如下：（1）探讨SPARC蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系。我们收集49例手术切除的胃癌组织和正常组织标本，采用免疫组织化学法检测SPARC的分布和表达，并检测胃癌组织中SPARC蛋白和mRNA的表达情况。SPARC蛋白和mRNA水平在胃癌组织中表达明显升高，其表达程度与胃癌的TNM分期、肿瘤分化显著相关，与血管侵犯和神经侵犯相关。SPARC的高表达有影响胃癌患者预后的趋势。（2）探讨SPARC对胃癌细胞生物学行为的影响。SPARC在5种胃癌细胞系中呈不同程度的表达。通过质粒转染，MTT实验，侵袭实验，流式细胞术以及动物模型建立，我们发现抑制SPARC的表达导致胃癌细胞增殖能力降低；细胞的侵袭能力明显下降；细胞凋亡明显增加，凋亡相关蛋白发生改变；体外成瘤能力降低。（3）探讨SPARC蛋白表达改变对胃癌细胞生长和对血管诱导能力及动物模型中成瘤能力的影响，并探讨其可能的分子机制。我们发现在胃癌细胞中，SPARC过表达能够通过抑制VEGF以及MMP-7表达分泌，抑制肿瘤细胞诱导的血管形成能力和肿瘤增生，同时ERK通路受到抑制；相应的，抑制SPARC表达可通过上调VEGF以及MMP-7表达分泌，促进肿瘤细胞诱导血管形成能力和增殖成瘤能力，同时ERK通路受到激活。通过上述研究结果，我们获得的结论是：抑制SPARC的表达对胃癌细胞系有潜在的抗肿瘤作用；SPARC蛋白表达的改变可以通过影响细胞VEGF和MMP-7表达分泌和血管生成，对肿瘤生长发挥作用；我们相信对SPARC进一步的深入研究，将有助于揭示肿瘤侵袭和转移的机制，为胃癌的早期诊断和治疗提供一个新的、有潜在可能性的肿瘤标志物和靶向目标。本研究发表英文SCI文章两篇，影响因子分别为4.09和2.15。发表国内核心期刊两篇。项目负责人赴国外参加国际会议一次并发表主题演讲。培养科研型和临床型博士研究生5名，已指导完成毕业论文3篇。