微囊化转GDNF基因嗅鞘细胞移植修复慢性脊髓损伤

脊髓损伤（SCI）危害严重，目前仍无有效的治疗方法。本项目拟采用分子克隆技术构建人GDNF cDNA真核表达质粒，运用细胞培养技术体外培养和纯化大鼠嗅鞘细胞（OECs），将GDNF cDNA体外转染OECs，然后将转染后的OECs包裹在海藻酸钠－聚赖氨酸－海藻酸钠膜（APA）微胶囊中，体外检测转基因产物GDNF的生物活性。建立大鼠慢性脊髓损伤模型，将转GDNF基因OECs微囊移植到大鼠损伤脊髓区，观察微囊在体内的存活及GDNF的分泌。采用神经传导束追踪、免疫组织化学染色、电镜等方法观察长传导束神经纤维（轴突）的再生和突触联系重建的形态学变化；运过神经电生理、BBB评分等方法观测大鼠脊髓损伤后神经功能的恢复情况。本课题旨在研究微囊包裹GDNF基因OECs对慢性脊髓损伤后轴突再生和功能恢复的影响，为临床上治疗截瘫患者提供新思路和新方法。