骨髓间充质细胞通过下调脾脏的免疫功能来改善缺血性脑卒中后进展性脑损伤

脾脏的免疫功能在缺血性卒中后进展性脑损伤中发挥作用。我们既往的研究以及国外研究发现，骨髓间充质细胞（MSC）可以通过脾脏诱导T细胞无反应性（anergy）来改善实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）的病情。近来的研究发现，MSC明显改善卒中的预后，但机制不详。本课题在我们既往研究的基础上，先建立大脑中动脉闭塞（MCAO）模型，用带有绿色荧光蛋白（eGFP））的腺病毒载体（Ad-eGFP）转染MSC（MSC-eGFP），体外培养MSC-EGFP，通过静脉注射MSC-eGFP来干预脾脏切除的MCAO鼠和脾脏未切的MCAO鼠，与生理盐水对照，来分析不同干预组鼠的神经功能评分，脾脏的免疫功能，脑梗塞体积的大小，炎症细胞、凋亡细胞、炎症介质、粘附分子，以阐明MSC是否通过下调脾脏的免疫功能来改善缺血性中风后的进展性脑损伤。

本课题探讨了脾脏是否在缺血性脑卒中后进展性脑损伤的发病机制中发挥作用，同时探讨了MSC是否通过调节脾脏的免疫功能在缺血性脑卒中后进展性脑损伤的治疗中发挥作用。以两周前切除脾脏的SD大鼠MCAO模型为研究对象，以正常SD大鼠MCAO模型为对照，运用免疫组化、RT-PCR、免疫荧光等多种实验手段， 观察两组发病前和发病后1，3，7天运动功能评分；脑梗死体积的大小，观察缺血中心及周边区炎症细胞（中性粒细胞、T淋巴细胞、单核巨噬细胞、小胶质细胞、星型胶质细胞）、炎症介质（IL-1和TNF-α，MCP-1和 MIP-1，iNOS 和MMP-9）、粘附分子（P-selectin，E-selectin，ICAM-1，VCAM-1）的表达是否增加，探讨脾脏是否在缺血性脑卒中后进展性脑损伤的发病机制中发挥作用。以eGFP+ MSCs静脉给药干预的正常SD大鼠MCAO模型为研究对象，以正常SD大鼠MCAO模型为对照，运用West-blot、免疫组化、RT-PCR、免疫荧光等多种实验手段，观察两组给药前和后1，3，7天运动功能评分，脑梗死体积的大小；观察eGFP+ MSCs是否在脾脏，脾脏的T淋巴细胞、IL-1和TNF-α、MCP-1和 MIP-1及VLA-4表达是否下调；观察缺血中心及周边区炎症细胞（中性粒细胞、T淋巴细胞、单核巨噬细胞、小胶质细胞、星型胶质细胞）数量是否下降、炎症介质（IL-1和TNF-α，MCP-1和 MIP-1，iNOS 和MMP-9）、粘附分子（P-selectin，E-selectin，ICAM-1，VCAM-1）的表达是否下调。探讨MSC是否可以通过下调脾脏的免疫功能来减轻缺血性脑卒中后进展性脑损伤。本课题组取得了良好的成果，发表了核心期刊论文二篇，SCI论文一篇待发表，另有一篇SCI正在写作中，培养了研究生3名。