用NTG硫霉素产生菌进行诱变处理,获得9株无活性阻断变株.用PIJ680为载体,以变株Y3为受体菌,用鸟柁法从硫雷素产生菌总DNA中克隆,得到能使Y3变株恢复产生生物活性物质的基因片段p6BC12,其分子大小为4.5kb.生物活性物质经纸层析后进行生物显迹.第三酮显迹和HPLC分析表明为硫霉素.Y3变株生物合成的中间积累物,经酸水解后低层析分析,证明是以谷氨酸,丙氨酸和甘氨酸等为主的肽类化合物,因此,确定Y3变株的阻断部位在形成碳青霉烯之前,外源基因的进入可以使Y3变株中被阻断的基因得到互补,而使Y3变株恢复产生硫霉素.含P6BC12的变铅青链霉菌TK24细胞抽提液,也可以使Y3恢复产生硫霉素.说明P6BC12含有硫霉素环化酶基因,并能在Y3及TK24中表达.
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数据更新时间:2023-05-31
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