ENaC参与滋养层侵入与血管重塑的机理及与子痫前期发病关系的研究

Preeclampsia is a unique complication of pregnancy, dominantly accouting for maternal and perinatal death.The pathogenesis of preeclampsia is associared with the inhibition of placental trophoblast invasion and differentiation is and vascular remodelling disorders.ENaC is a Na+ channel widely expressed in a variety of epithelial cells, invloved in a variety of physiological processes,including blood pressure regulation.Recent studies show that ENaC is involved in tumor metastasis and invasive process. The biological behavior of trophoblast is similar to reoplasia cells.Activation or downregulation of ENaC proteases are also involved in trophoblast invasion and angiogenesis, which suggests that ENaC should be involved in the pathogenesis of preeclampsia.In our previous studies,we have found that expression of ENaC in placenta of preeclampsia patients decreased obviously. Knockdown of ENaC inhibited the trophoblast cell's migration and invasion.We intend to explore the association of between ENaC and trophoblast invasion and vascular remodeling and the effects of ENaC on the injury of endothelial cells induced by angiogenic factors.Our work focusing on the explozation of the role of ENaC in pathogenesis of preeclampsia might give us some novel therapectic targets against this disease.

子痫前期是妊娠期特有的并发症，是孕产妇、围生儿死亡的重要原因。胎盘滋养层侵入、分化受到抑制及血管重塑障碍是其主要发病机制，血管内皮细胞损伤是病理基础。ENaC是一个广泛表达于各种上皮细胞的Na+通道，对多种生理过程尤其血压调节非常关键。最近研究表明ENaC参与肿瘤转移和侵入过程，而滋养层细胞生物学行为与肿瘤类似，多种能激活或抑制ENaC的蛋白酶参与滋养层侵入过程并调节血管生成，这些都提示ENaC可能参与子痫前期的发病过程。本课题组前期研究发现ENaC在子痫前期病人胎盘上的表达明显降低，抑制ENaC表达可降低胎盘滋养细胞的侵袭和迁移能力。本研究拟从分子、细胞、组织及动物模型各个层面探讨ENaC对滋养层侵入和血管重塑的调节作用，以及如何调控血管生成因子的分泌导致内皮损伤，探索ENaC在子痫前期病机中的可能作用，为探索其早期干预的手段和靶点提供新的思路。

子痫前期是妊娠期特有的并发症，是孕产妇、围生儿死亡的重要原因。目前普遍认为胎盘是其发病的根源。研究已经发现上皮细胞钠离子通道ENaC在女性生殖道中广泛表达，并且在子宫内膜中的表达随着动情周期具有周期性的变化，提示ENaC可能在女性生殖的多个事件中发挥着作用。在胚胎着床过程中子宫内膜上皮的ENaC表达上调；用ENaC的特异性抑制剂或siRNA干扰ENaC能够显著抑制蜕膜化以及最终的着床率，因此子宫内膜上皮的ENaC在胚胎着床过程中发挥了重要作用。值得注意的是，研究发现ENaC不仅在母体的子宫内膜上表达，而且也在胎盘滋养层细胞上表达。本研究主要从组织、细胞两个层面探讨ENaC对滋养层侵入和血管重塑的调节作用及其机制，探索ENaC在子痫前期发病中的可能作用机制，为发现其早期干预及治疗手段提供新的思路。研究分为几个部分：1、纳入58例重度子痫前期、53例正常妊娠孕产妇，应用逆转录聚合酶链反应法、荧光定量逆转录聚合酶链反应法检测胎盘组织中ENaC mRNA的表达；应用蛋白免疫印迹法检测胎盘组织中ENaC蛋白水平的表达；免疫组织化学技术检测钠离子通道（ENaC）在孕妇胎盘组织中的表达及定位。2、观察孕期雌孕激素、醛固酮对人绒毛外胎盘滋养层细胞系（HTR-8/SVneo cell line）中ENaC 表达的影响。3、采用小干扰RNA（SiRNA）下调人绒毛外滋养层细胞系（HTR-8/SVneo cell line）中ENaC的表达，应用阿米洛利抑制ENaC的功能，观察胎盘滋养细胞侵袭与迁移能力的变化。4、用阿米洛利、小干扰RNA（SiRNA）处理HTR8后，检测基质金属蛋白酶MMP2表达的改变（具体结果见报告正文）。根据我们的实验结果分析，推测ENaC可以通过改变基质金属蛋白酶MMP2的表达影响人类胎盘滋养层细胞的侵袭与迁移能力，从而参与子痫前期的发病。