Kuffer细胞通过Tim-3/Galetin-9通路诱导T细胞免疫耐受促进HBV免疫逃逸的机制研究

CD8+T细胞免疫耐受是导致HBV感染慢性化的主要原因，功能缺陷和易于凋亡是耐受的主要表现，抑制性受体高表达和Treg细胞增加是诱导耐受的关键因素。TIM-3是新近发现与CD8+T细胞耐受相关的抑制受体，其配体Galectin-9也通过诱导Treg分化促进免疫耐受。我们研究发现：HBV慢性感染患者HBV特异性CD8+T细胞高表达TIM-3，Kupffer细胞则高表达Galectin-9。那么Galectin-9/TIM-3信号通路是否促进了CD8+T细胞功能缺陷和凋亡，进而导致HBV感染慢性化？本研究拟分析二者表达在HBV慢性感染中的作用；阻断后对HBV特异性CD8+T细胞功能的影响；以免疫缺陷型HBV转基因小鼠模型，在体分析其在慢性乙型肝炎发生发展中的免疫调控。本研究可加深对CD8+T细胞免疫耐受的认识，有利于深入理解HBV感染慢性化机制，为HBV慢性感染免疫治疗提供新思路。

CD45RA-FoxP3hi的效应Tregs（activated regulatory T cells, aTregs）代表着Treg中有功能的一群细胞，但这群细胞在肝细胞癌（HCC）进展中的作用仍不清楚。我们收集了85例HCC肿瘤组织和癌旁组织分析Treg的分布和特征。流式细胞仪检测显示，大量的aTregs聚集在HCC肿瘤组织。而且，在肝癌中aTregs分为Tim-3+和Tim-3-的两群细胞，Tim-3+aTreg细胞的比例与HCC的进展均密切相关。Tim-3+aTregs表达高水平的CTLA-4、GITR和CD39，分泌高水平的IL-10和TGF-β，但IFN-γ、IL-2和IL-17的水平较低。表明Tim-3+aTreg的抑制功能更强大。此外，分析发现Tim-3+aTregs，而非Tim-3- aTregs，与Foxp3-效应T细胞的增殖呈负相关。Galectin-9是Tim-3的配体，在肿瘤组织中的表达增加，体外实验发现galcetin-9可以诱导Tim-3-aTregs分化为Tim-3+aTregs。最后，我们还证明, Tim-3+aTregs的比例与肿瘤组织中CD8+T细胞的百分比以及病人的存活率均成负相关。这些结果表明，Tim-3+aTregs是一种新的调节性T细胞亚群，促进肝癌的进展。