TLR3在HBsAg阳性母亲婴儿乙肝疫苗无弱应答中的作用

HBsAg阳性孕妇婴儿乙肝疫苗无/弱应答严重影响这一特殊人群及一般人群乙肝防治效果，但其机制尚未明了。本项目在既往研究的基础上，从乙肝疫苗免疫应答过程的第一环节入手，以HBV感染与清除相关的Toll样受体3(TLR3)为切入点，从前瞻性研究和体外干预实验两方面探讨TLR3在HBsAg阳性孕妇婴儿乙肝疫苗免疫应答中的作用。①用分子流行病学的研究方法了解TLR3对DC、CD4+CD25+Treg、B细胞、辅助T细胞数量和功能及Th1/Th2相关细胞因子表达水平的影响，探讨TLR3与T细胞亚群及相关细胞因子等因素在乙肝疫苗无/弱应答中的作用。②以无/弱应答婴儿PBMC进行体外干预实验，通过活化TLR3观察抗原递呈和保护性抗体分泌相关T细胞的变化，探讨逆转HBsAg阳性母亲婴儿乙肝疫苗无/弱应答状态及建立正常免疫应答的可能性，为降低这一特殊人群乙肝疫苗无/弱应答率提供新思路。

目的：探讨天然免疫受体TLR3在改善HBsAg阳性母亲婴儿乙肝疫苗无/弱应答状况中的可能作用及其与Th1/Th2相关细胞因子、T细胞亚群、B细胞、树突状细胞（DC）及CD4+CD25+Treg等因素的关系。.方法：用分析性流行病学方法探讨TLR3基因和蛋白表达水平、相关免疫细胞以及细胞因子与HBsAg阳性母亲婴儿乙肝疫苗免疫应答水平的关系，用体外细胞实验探讨活化TLR3对相关免疫细胞的影响，阐明TLR3在免疫无/弱应答中的作用。.结果：人群研究基线调查结果显示，宫内传播HBV新生儿TLR3表达水平高于非传播新生儿，宫内传播HBV新生儿外周血T细胞亚群CD3+、CD4+、 CD8+和CD4+/CD8+和B细胞高于非传播新生儿。宫内传播HBV新生儿外周血树突状细胞mDC和pDC亚群、CD4+CD25+Treg含量，尚未发现差异具有统计学意义。尚不能说明T细胞亚群、B细胞、DC及CD4+CD25+Treg与HBsAg阳性母亲婴儿发生宫内传播相关。.人群研究随访调查结果显示，乙肝疫苗免疫强应答婴儿TLR3蛋白和TLR3 mRNA表达量高于无/弱应答婴儿，提示TLR3在婴儿乙肝疫苗免疫无/弱应答中可能具有保护作用。乙肝疫苗免疫强应答婴儿CD4+T细胞和mDC相对比例高于无/弱应答婴儿，提示其在婴儿乙肝疫苗无/弱应答过程中可能发挥一定作用。与强应答婴儿相比，无/弱应答婴儿IL-6的含量降低，IL-12含量升高，差异具有统计学意义。.体外研究结果显示，无/弱应答婴儿TLR3蛋白经PolyI:C刺激活化后含量升高， mDC/pDC比值、CD4+/CD8+、Treg均随TLR3蛋白含量升高而降低，提示体外活化新生儿TLR3，可能改善其乙肝疫苗无/弱应答状况，新生儿相关免疫应答T细胞、DC、Treg在体外活化TLR3改善乙肝疫苗无/弱应答状况过程中可能发挥一定作用。体外三种处理组，乙肝疫苗无、弱应答组IL-6均低于强应答组,IL-12均高于强应答组，提示IL-6，IL-12对婴儿乙肝疫苗免疫效果有一定影响作用。但尚未见活化TLR3对IL-6和IL-12产生影响。.结论：TLR3在HBsAg阳性母亲婴儿乙肝疫苗无/弱应答中可能具有保护作用，体外活化PBMCTLR3可能改善其乙肝疫苗强免疫应答效果， T细胞、B细胞、DC、Treg细胞在改善乙肝疫苗无/弱应答状况过程中可能发挥一定作用。