缺乏理想的可以实时观测肝细胞凋亡的小动物实验模型, 不便于靶向caspase-3蛋白酶药物体内筛选及评价。本研究拟构建以荧光素酶为报告基因反映caspase-3蛋白酶活性的表达载体,通过水动力转染方法和噬菌体整合酶系统,将此载体整合到小鼠肝脏染色体上,建立caspase-3蛋白酶活性报告基因小鼠肝脏长期稳定表达模型,并应用活体荧光成像技术实时监测多种因素导致肝脏细胞凋亡引起蛋白酶caspase-3体内活性的变化,为体内研究caspase-3蛋白酶功能,以及以caspase-3蛋白酶为靶标的抗凋亡药物筛选及体内作用的稳定评价创造条件。也是探索一种以成年小鼠为基础的,建立目的基因体内表达模型动物实验体系的过程。
缺乏理想的可以实时观测肝细胞凋亡的小动物实验模型, 不便于靶向caspase-3蛋白酶药物体内筛选及评价。本研究构建了以荧光素酶为报告基因反映caspase-3蛋白酶活性的表达载体attB-ANLuc(DEVD)BCLuc,通过水动力转染方法和噬菌体整合酶系统,将此载体整合到小鼠肝脏染色体上,建立caspase-3蛋白酶活性报告基因小鼠肝脏长期稳定表达模型,并应用活体荧光成像技术实时监测多种因素(LPS/GalN或MHV-3诱导的肝损伤) 导致的细胞凋亡蛋白酶caspase-3体内活性的变化,为体内研究caspase-3蛋白酶功能,以及以caspase-3蛋白酶为靶标的抗凋亡药物体内作用的稳定评价及筛选创造条件。也是探索一种以成年小鼠为基础的,建立目的基因体内表达模型动物实验体系的过程。
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数据更新时间:2023-05-31
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