基于噬菌体展示技术的人Rh(D)血型抗原表位筛选

Rh(D)血型不合溶血病是严重危害人类健康的主要溶血病之一。目前确诊都是利用标准谱细胞检测抗Rh(D)抗体的存在，但这些细胞存在保存时间短、抗原含量难以标准化和生物安全性等方面的问题，从而影响疾病的诊断。近年来抗原表位模拟肽在病原体感染诊断等方面已有应用。本项目是在前期已用抗Rh(D)单克隆抗体筛选噬菌体肽库获得Rh(D)抗原表位模拟肽基础上，拟用人源纯化的混合抗Rh(D)多克隆血清筛选肽库。该研究是通过对噬菌体肽库的3轮淘洗，经噬菌体ELISA和交叉反应试验后，对阳性克隆进行DNA序列测定和抗体竞争抑制试验，获得一系列Rh(D)血型抗原模拟表位。同时采用蛋白免疫印迹法和ELISA对所获表位模拟肽进行免疫原性分析和比较，并对优势表位模拟肽基因进行串联、表达载体构建、酵母真核表达和融合蛋白的特性鉴定。结果将为研制检测抗Rh(D)抗体的诊断抗原和高效诊断Rh(D)血型不合溶血病奠定基础。