端粒末端转录酶的提取及其在肿瘤发生发展中的作用

利用RT-PCR法克隆了telomerase的蛋白质（hTRT）的mRNA中1154bp的cDNA片段，并将其插入Pin-Point表达性载体。经诱导表达后获得了分子量约为40KD的多肽片段，用该片段免疫Balb/c小鼠后获得了鼠抗hTRT单克隆抗体。经检验该抗体能沉淀teomerase活性，证明其为抗telomerase抗体。此外还将hTRT的1154bp的cDNA片段插入Easy-T-Vector，并利用其双向表达功能制备出正键和反意义键的mRNA探针。目前，我们已经利用该单克隆抗体在体外培养的人白血病细胞k-562中初上建立了telomerase蛋白质成原位检测的方法。为在组织切片中进行应用研究打下了良好的基础。