两种马醉木属植物中新颖结构二萜类成分的发现及其镇痛活性研究

The leaves and branches of Pieris formosa are used to treat tinea and scabies as a traditional Chinese medicine. Previously several diterpenoids with analgesic activity were isolated from the active ethyl acetate extract of the twigs of P. formosa. Therefore, on the chemical screen and the activity screen, we plan to carry out the investigation of two species in the genus Pieris (roots and stems of P. formosa, roots and twigs of P. japonica) to find 1-2 active diterpenoids with novel structures and significant analgesic activity to treat pain.

前期研究从杜鹃花科植物美丽马醉木枝叶的镇痛活性部位中获取了15个木藜芦烷型二萜类成分，8个为结构新颖的化合物。活性筛选发现，8个化合物表现出显著的镇痛活性（P < 0.01），其中3个化合物镇痛活性更加显著，在0.08 mg/kg剂量下抑制率分别能达到37.6%、49.8%和56.8%。而对照品吗啡在十倍的剂量下才能达到相同的镇痛效果。.本项目拟在此基础上，将化学筛选和活性筛选集成应用，从美丽马醉木（Pieris formosa）的根和茎、马醉木（P. japonica）的根和枝叶的镇痛活性部位中快速识别、锁定二萜类成分，进而针对性地获取可能是新颖结构的活性二萜类化合物，并测定它们的化学结构。对获得的化合物进行体内外镇痛活性的测定，根据活性测定结果和化合物的结构特征，分析初步的构效关系和初步作用机制研究，优选出1-2个结构新颖、活性显著的创新药物先导化合物，为创制新型镇痛药物奠定基础。

本项目完成课题预期研究计划。.项目围绕研究目标，结合应用化学筛选和活性筛选及评价，从云南和福建美丽马醉木的根、茎和枝叶等药用部位提取物的镇痛活性部位中高效分离获取了117个化合物，采用单晶X-衍射、核磁共振波谱等方法测定其结构。发现新颖结构二萜类化合物61个，发现3个罕见A-homo-B-nor-对映-贝壳杉烷型新颖骨架结构二萜类化合物。.进一步的活性评价发现62个二萜化合物具有显著的镇痛活性，其中7个二萜化合物表现出了良好的量效关系。通过活性数据分析，初步阐明了木藜芦烷型二萜镇痛活性的构效关系，并优选出1个活性先导物正在进行初步的作用机制研究。.此外，其他活性测定结果表明，9个二萜类化合物表现出了良好的小菜蛾拒食活性，IC50在79.0--376.2 mg/L之间；在高表达KCNQ2钾离子通道细胞模型中，1个二萜类化合物表现出对KCNQ2钾离子通道的抑制活性；3个酚类化合物在过氧化氢诱导、谷氨酸诱导、糖氧剥夺诱导损伤的SH-SY5Y细胞筛选模型上均具有较好的神经保护作用。.研究结果已在国际期刊Org. Lett., Bioorg. Chem., Tetrahedron, RSC Ad., Fitoterapia上发表SCI论文5篇，核心期刊论文1篇。培养研究生3名。