中药天花粉蛋白对感觉神经元的毒性及其机理与临床运用的研究

传统中药天花粉蛋白（Trichosanthin，TCS）属I型核糖体灭活蛋白, 具有多种生物学及药理学活性, 在项目组前期的工作中发现TCS还具有选择性神经毒性和可以诱导非炎症性细胞凋亡的特性。本项目主要将TCS、经FITC标记的TCS以及经胶体金标记的TCS分别注射于SD大鼠的L4、L5脊髓背根神经节、坐骨神经及眶下神经孔处，利用神经轴突的逆向轴浆运输特性，运用免疫组化、TUNEL技术、透射电镜等方法追踪研究TCS对背根神经节和三叉神经半月节内感觉神经元,特别是痛觉神经元的特异性神经毒性，并结合神经元的细胞培养和流式细胞仪等先进技术研究TCS对痛觉神经元的特异性毒性机理和细胞内机制。此项目不仅可填补目前尚未发现特异性、永久性痛觉神经元抑制剂的研究空白，更有望为受到顽固神经痛困扰的患者提供一种安全、特异性高、只抑制痛觉神经元的新的药物治疗方法，也为传统中药天花粉蛋白增添了新的用途和活力。

天花粉蛋白TCS属I型核糖体灭活蛋白，具有抗孕引产、抗肿瘤、抗艾滋病病毒等多种生物学活性。天花粉蛋白TCS的神经毒性研究报道较少，本课题在课题负责人前期研究的基础上主要对天花粉蛋白对感觉神经元的毒性和机理进行研究。首先用免疫组化方法完成对SD大鼠背根和三叉神经节感觉神经元痛觉神经元的成分分析，发现痛觉神经元在背根和三叉神经节两处所占比例相仿。然后用TCS处理原代培养的感觉神经元，发现其毒性具有浓度和时间的双重依赖效应。进行TCS的荧光FITC标记等，相关毒性机理研究发现TCS进入痛觉神经元，并通过诱导感觉神经元发生细胞凋亡从而发挥其神经毒性作用。这一研究不仅填补了一些文献资料的空白，也为开发传统中药天花粉蛋白的新功能和治疗顽固性神经痛提供了一个新的思路和相关的基础研究数据。