本课题利用PCR技术体外扩增绿脓杆外毒素(Ⅱ+Ⅲ)结构域片段,与不含信号肽的IL-2cDNA重组成IL-2-PE45 嵌合毒素,经重组子一PCR鉴定和酶切鉴定,均符合要求,将嵌合基因分别克隆至经过不同程度改构的原核表达载体(42℃)诱导后,表达量在15-18%这间,SDS-PAG电泳检查,表达产物的分子量为5.5kD左右,包含体蛋白与PE抗血清或IL-2-McAb进行ELISA检查,证实了表达产物含有双应抗原存在。初步纯化产物的离体细胞学实验证实了毒素活性存在。本课题基本按计划完成,其中也作了部分调整,并获得初步实验结果,如果能在此基础上进一步得到资助。可望转向应用研究。
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数据更新时间:2023-05-31
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