β淀粉样蛋白在子痫前期螺旋动脉血管重铸中的作用及机制研究

Preeclampsia (PE) is a placenta origin disease, which is a major cause of maternal, fetal and neonatal morbidity and mortality. Recent proteomics studies have found that a variety of misfolding proteins, including beta-amyloid (Aβ) are accumulated in the placenta of PE patients, suggesting that PE could be a kind of conformational disease. But the role and mechanism of protein misfolding and aggregation in the pathogenesis of PE are still unknown. In our previous studies, we found that abundant of oligomerized Aβ aggregated in placental villous trophoblasts and stroma. In vitro stimulation of HTR-8 / SVneo with Aβ not only inhibited cell migration, invasion and angiogenesis, but also upregulated the expression of receptor for advanced glycation end product（RAGE），nuclear factor kappa-light- chain-enhancer of activated B （NF-κB），and soluble fms-like tyrosine kinase-1 （sFlt-1）. These results suggested that Aβ misfolding and abnormal aggregation in placenta may affect the remodeling of uterine spiral arteries through activation of RAGE and NF-κB, which finally promote the development of PE. Through in vitro trophoblast and placental explants culturing, and PE mouse model establishing, we will try to determine the role and mechanism of Aβ in inhibiting the remodeling process of uterine spiral artery in PE patients. We hope that our research will provide novel theory for PE pathogenesis, and provide new target for the prevention and treatment of PE.

子痫前期（PE）是严重危害母儿健康的妊娠期特发性疾病，胎盘形成缺陷是PE发病的始动因素。最近蛋白质组学研究发现，包括β淀粉样蛋白（Aβ）在内的多种错误折叠蛋白异常聚集于PE患者的胎盘，提示PE可能是一类蛋白质构象病，但是错误构象蛋白在PE发病中的作用和机制尚不清楚。我们前期研究发现，大量寡聚化的Aβ聚集于PE患者的胎盘绒毛滋养细胞；Aβ体外刺激滋养细胞株HTR-8/SVneo可导致细胞迁移侵袭功能下降；Western Blot 检测发现RAGE、 NF-κB、sFlt－1表达上调，I-κB，MMP2表达下调，提示Aβ作为一类新的致病介质，可能通过RAGE介导的信号转导通路影响子宫螺旋动脉重铸障碍，促进PE发生。本项目拟通过体外培养滋养细胞、绒毛外植体及建立PE小鼠模型，从分子、细胞、组织、动物水平，探讨Aβ在PE发生的分子机制，从而为PE的发病提供新理论，为早期防治PE提供新靶标。

子痫前期（Preeclampsia，PE）是一种以高血压和蛋白尿为主要临床表现、严重危害母儿健康的妊娠期特发性疾病。目前主流观点普遍认为胎盘形成缺陷是PE发病的始动因素，子宫螺旋动脉重铸障碍是导致胎盘形成缺陷重要原因。最近蛋白质组学研究发现，包括β淀粉样蛋白（amyloidβ-protein，Aβ）在内的多种错误折叠蛋白异常聚集于PE患者的胎盘绒毛滋养细胞及绒毛间质，提示PE可能是一类蛋白质构象疾病。 本项目通过体外培养细胞模型及体内动物实验探讨了Aβ错误折叠及异常聚集在PE发生发展的分子机制，特别关注子宫螺旋动脉重铸障碍。同时在此基础上进一步探讨了阿司匹林及胆酸对HTR-8/SVneo胎盘滋养细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。主要研究内容及取得的重要结果如下：. 首先我们探讨了β淀粉样蛋白1⁃42对滋养细胞迁移和侵袭的影响，研究发现Aβ1⁃42抑制滋养细胞迁移、侵袭的能力，可能导致子宫螺旋动脉血管重铸障碍。具体结果为：Aβ1⁃42（10 μmol/L）处理滋养细胞后，细胞活力显著降低，细胞迁移及侵袭能力减弱，N⁃cadherin、vimentin蛋白表达水平下调，细胞培养上清液中MMP⁃2、MMP⁃9表达水平及活性均显著下降；同时给予1：750稀释抗Aβ1⁃42抗体处理后，细胞迁移及侵袭能力，N⁃cadherin、vimentin蛋白表达水平，MMP⁃2、MMP⁃9表达水平及活性均显著上升。其次我们探讨了阿司匹林对TNF-α诱导人早孕滋养细胞增殖和侵袭的影响，研究发现：小剂量阿司匹林可以促进绒毛滋养细胞增殖和侵袭，可能有利于改善PE胎盘浅着床和子宫螺旋动脉重铸异常情况，为阿司匹林预防PE的发生提供实验依据。接着我们探讨了内质网应激介导滋养细胞凋亡在妊娠期肝内胆汁淤积症中的作用及机制，研究发现去氧胆酸可以呈浓度依赖性地促进滋养细胞内质网应激相关基因mRNA和蛋白的表达，引起细胞凋亡。最后我们还探讨了石胆酸介导的mTOR信号通路及内质网应激在妊娠期肝内胆汁淤积症的作用及调控机制。研究发现石胆酸可显著激活mTOR信号通路继而引起内质网应激，导致胎盘滋养细胞死亡。