双作用靶点水蛭素的优化设计及其口服药物表达新技术研究

口服水蛭素新变体药物研究对防治心脑血管栓塞性疾病具有十分重要的应用价值。本组前期研究发现，当用整合素吸附序列RGD替代水蛭素III分子指状结构非功能区(33～35位点)时，其新增抗血小板聚集活性的高低与紧随其后的第36位氨基酸种类密切相关，因此，本研究拟对该关键位点进行点饱和性突变分析，以筛选出最适合该位点的氨基酸残基，从而设计出具最佳双重抗凝抗栓活性的水蛭素新变体药物。在此基础上，研究构建具自主知识产权、适合分子内含多个二硫键的水蛭素类分子自动正确折叠的新型乳酸菌高效分泌表达系统，内容包括：①信号肽选择以及与分泌增强序列的匹配；②强启动子优选与串联；③乳酸菌偏爱密码子的应用；④与之配套的宿主菌筛选；⑤反应器规模发酵条件优化等。本研究显著优点:水蛭素新变体药物结构新颖，抗凝抗栓活性优于现有水蛭素类药物；构建的乳酸菌高效分泌表达系统具有创新性，表达产物不含任何毒物质，简单纯化后即可口服给药。