特异性蛋白质相互作用网络在脑梗死发生中的作用及中药脑泰方干预机制研究

At present , most of the research about the cerebral infarction (CI) pathogenesis are through testing a biochemical index to understand CI pathophysiological status, the content of research is single, not form systematic research on "protein-small molecules (biological pathways)-effect" of the system research, so can't do comprehensive expounds on the pathogenesis of CI. For in CI pathophysiological process regulation pathways of protein interactions between the research has not been found in the report. Over 10 years research research shows that Naotaifang has a good anti-clotting effect on CI, and the therapeutic effects is based primarily on a series of protein interactions between the results.So we plan to use comparative proteomic technologies looking for and screening the specific protein of cerebral infarction (CI), combine with KEGG network database, study the interactions of characteristic proteins in the process of development of the CI, and illuminate the molecular mechanism of regulation network of CI,and using the calculation software Matlab 7.0 simulation platform Simulink tool box to build the dynamic model of the signal transduction. The research is of important value for exploring the mechanism of CI, clarifying the effect linkof Naotaifang, and looking for new drug target, developed a real clinical significance drug treatment.

当前围绕脑梗死（CI）发病机制所做的多数研究均是通过检测某一生化指标用以了解CI病理生理状况，研究内容单一，没有形成"蛋白质-小分子物质（生物通路）-效应"的系统研究，难以全面阐明CI的发病机理。尚无对在CI病理生理过程中调控通路的蛋白质之间相互作用的研究报道。前期研究表明：本课题组十余年来研究的"脑泰方"是治疗脑梗死的有效中药方剂，其药效作用主要是基于一系列蛋白质之间的相互作用的结果。本课题拟运用比较蛋白质组学技术寻找脑泰方治疗CI的特征性蛋白质，加以筛选鉴定，利用生物信息学方法，结合KEGG网络数据库，研究CI发生发展过程中特征性蛋白之间的相互作用，阐明相关调控网络机制；并利用计算软件Matlab7.0仿真平台Simulink工具箱构建信号途径的动力学模型加以验证。本研究的开展对于探索CI的发生机制、阐明脑泰方作用环节、寻找新的药物靶标、开发出具有真正临床意义的治疗药物具有重要价值。

当前围绕脑梗死（CI）发病机制所做的研究均是通过检测某一生化指标用以了解CI病理生理状况，研究内容单一，没有形成“蛋白质-小分子物质（生物通路）-效应”的系统研究，难以全面阐明CI的发病机理。尚无对在CI病理生理过程中调控通路的蛋白质之间相互作用的研究报道。本课题运用比较蛋白质组学技术寻找脑泰方治疗CI的特征性蛋白质，加以筛选鉴定。结果表明：. 通过2-DE电泳获得蛋白胶图，利用Bio-Rad公司的PDQuest 8.0.1软件进行胶图比对：. 假手术组与“假手术+脑泰方组”2-DE胶图比较分析：对假手术组与“假手术+脑泰方组”2-DE胶图扫描结果进行比较，结果显示，假手术组与“假手术+脑泰方组”存在26个差异蛋白点， “假手术+脑泰方组”中22个表达下调，4个表达上调。. 脑梗死组与“脑梗死+脑泰方组” 2-DE胶图比较分析：对脑梗死组与“脑梗死+脑泰方组2-DE胶图扫描结果进行比较，结果显示，脑梗死组与“脑梗死+脑泰方组”存在50个差异蛋白点，“脑梗死+脑泰方组”中40个表达下调，10个表达上调。. 脑梗死组与假手术组 2-DE胶图比较分析：对脑梗死组与假手术组2-DE胶图扫描结果进行比较，结果显示，脑梗死组与假手术组存在24个差异蛋白点，脑梗死组中11个表达下调，13个表达上调。. “假手术+脑泰方组”、“脑梗死+脑泰方组” 2-DE胶图比较分析：对“假手术+脑泰方组”、“脑梗死+脑泰方组”2-DE胶图扫描结果进行比较，结果显示，“假手术+脑泰方组”、“脑梗死+脑泰方组”存在46个差异蛋白点， “脑梗死+脑泰方组”中28个表达下调，18个表达上调。提示中药脑泰方治疗脑梗死作用存在多个药效物质基础多种作用机制，脑梗死其发生发展与细胞因子、神经递质、和蛋白质调控等诸多因素密切相关。. 差异蛋白质经质谱鉴定分别为转铁蛋白、免疫球蛋白Fc受体、补体B因子、间-α-胰蛋白酶抑制因子等36个特异性蛋白质，利用生物信息学方法经检索发现这些蛋白质可能参与其抗凝血促纤溶作用机制相关。这些蛋白质参与参与血管新生、炎症调控等病理生理过程，对研究脑泰方作用的可能有效靶点及其信号转导通路意义重大,有待进一步研究。. 本研究对于探索CI的发生机制、阐明脑泰方作用环节、寻找新的药物靶标、开发出临床治疗药物有重要价值。