SPTT和miR-100联合应用阻遏TF信号传导通路对结直肠癌转移和肿瘤相关性血栓形成的抑制效应

Tumor metastasis and Cancer Associated Thrombosis (CAT) are mutually promoting and developing as the partners, which excessive expression of tissue factor (TF) is one of the possible coupling axis.This study analysis the levels of tissue factor-bearing microparticles (TFMPs) of peripheral blood, the protein and mRNA of TF and TF pathway inhibitor methylation in patients with colorectal cancer (CRC) and the animal model of CRC metastasis and CAT form, then investigate the relationship and influencing factors between tumor metastasis and CAT form, and elucidate the role of TF expression and TF signaling pathways in cancer metastasis and CAT form further; By using our screened TF targeted inhibition peptide SPTT and TF expression inhibitory small RNA (miR-100) to interfere TF signal pathways from multiple levels, study the inhibition of colorectal cancer metastasis and CAT formation after suppressing TF signal. This study can be elucidated the common pathogenesis of tumor metastasis and CAT formation, and also contribute to make new prevention and treatment strategies of CRC from the perspective of thrombosis and Tumor metastasis.

肿瘤转移与肿瘤相关性血栓（CAT）形成是一对相互促进和发展的“伙伴”，组织因子（TF）过度表达是其偶联轴心之一。本课题以结直肠癌（CRC）转移和CAT形成动物模型、CRC患者为研究对象，分析外周血TF微粒（TFMPs）、肿瘤组织TF蛋白和TFmRNA表达水平、TF途径抑制物（TFPI）甲基化水平等因素与肿瘤转移和CAT形成的关系，探讨肿瘤转移和CAT形成的相关性和影响因素，阐明TF表达、TF信号传导通路在肿瘤转移和CAT形成中的作用；并用申请人前期筛选的TF高亲和短肽SPTT、TF表达抑制性小RNA（miR-100）从多个环节阻遏TF信号传导通路，研究TF信号传导阻遏对CRC转移和CAT形成的抑制效应。本项研究有利于阐明肿瘤转移和CAT形成的共同发病机制，并针对肿瘤转移和CAT形成的契合点提出新的肿瘤防治策略。

肿瘤转移与肿瘤相关性血栓（CAT）形成是一对相互促进和发展的“伙伴”，组织因子（TF）过度表达是其偶联轴心之一。本项目研究TF靶向肽SPTT联合miR-100阻遏TF信号传导通路对结直肠癌转移和肿瘤相关性血栓形成的抑制效应，主要创新工作包括：.（1）TF靶向肽筛选：提出了一种新的细胞跨膜受体噬菌体展示筛选靶向肽方法---受体-细胞交替噬菌体筛选法，获得了TF高亲和力靶向肽。.（2）发现肿瘤TF高表达可以促进结直肠癌转移和CAT形成：TF高表达结直肠癌外周血TF循环颗粒（TFMPs）更多，而且更容易发生远处转移和CAT形成，也即TF高表达可以促进结直肠癌转移和CAT形成。.（3）发现外周TFMPs可以作为预测结直肠癌转移和CAT形成的预警标志物：有肝、肺转移患者比无转移患者TFMPs明显升高（P<0.05），其中肝肺均有转移患者比肝、肺单独转移患者TFMPs明显升高（P<0.05），肝、肺单独转移患者之间TFMPs无明显差异（P<0.05）；有血栓患者比无血栓患者TFMPs高（P<0.05）。.（4）SPTT联合miR-100对结直肠癌转移和CAT形成的抑制效应研究：发现SPTT及SPTT联合miR-100-AVV干预对结直肠癌有抑制作用，同时可以预防肿瘤转移和CAT形成，效果优于低分子肝素钠，但miR-100-AVV单独应用对结直肠癌生长、转移和CAT无明显抑制作用。.（5）发现SPTT联合miR-100-rAVV治疗结直肠癌肝转移和CAT机制与SPTT等抑制肿瘤TF表达有关：SPTT作用后的结直肠癌细胞TF表达、TFmRNA表达均下降，TFPI甲基化水平升高，提示SPTT对治疗结直肠癌肝转移和CAT机制与SPTT等抑制肿瘤TF的表达和功能有关。.本项目发表中国核心期刊论文1篇；在国内、国际会议进行交流和推广1次；研究成果编入《肿瘤患者血栓防治》专著；研究成果拟投SCI专业杂志发表论文3篇，并拟联合研究课题申请省级科技进步二等奖；已申报国家发明专利1项，培养研究生2名，达到了项目预期目的。