博落回提取物对断奶仔猪采食性能的影响及其作用机制研究

Feed intake is one of the key restriction factors on the pig's growth. In the process of piglet weaning, declining feed intake could cause gastrointestinal damage even death. Accumulate studies indicated that plant bioactive components are capable to act as alternatives to the established antibiotics. However, the underlying mechanisms remain undefined. Previous studies demonstrated that macleaya cordata extracts could increase feed intake and improve growth performance in piglets. Sanguinarine is one of the macleaya cordata extracts approved by the EU as phagostimulant in feed. The present study is trying to investigate the effect of macleaya cordate on feed intake and their molecular mechanisms in piglets from the aspect of endocrine physiology. The levels of appetite-regulating hormones including Ghrelin, CCK, Leptin and their respective receptors will be measured in blood, gastrointestinal tissues，fat tissues and nervous tissues by using ELISA 、Western-blotting and RT-PCR. The expression of the genes involved in feed intake will be analyzed by gene chip quantitative measurement.We are trying to provide a molecular basis to the use of sanguinarine or other plant bioactive components in feed.

采食量是影响动物生长发育的一个重要因素，仔猪断奶过程中容易发生采食量下降并引起仔猪胃肠道受损甚至死亡。近年来，植物提取物替代抗生素在增强动物采食性能中起到积极作用，但在开发应用中仍存在诸多问题，揭开其具体作用机制是解决系列问题的关键。前期研究表明博落回提取物对仔猪采食性能具有良好的促进作用，欧盟已批准其作为天然诱食剂添加到饲料中，但其作用机制尚不明确。因此，本项目拟通过ELISA、Western-blot、RT-PCR、基因芯片等分子生物学方法来研究博落回提取物对断奶仔猪血液、胃粘膜组织、脂肪组织和下丘脑神经组织中食欲调节激素（Ghrelin、CCK、Leptin）的含量、受体水平、基因表达的影响，并进一步探索其作用机制，为植物提取物替代抗生素在增强早期断奶抗应激能力及仔猪饲料中的应用提供理论依据。

本研究探讨了博落回生物碱对肠上皮细胞IPEC-1的增殖及胃泌素表达的影响。结果表明0.00625~0.1 µg/mL的血根碱、0.00625~0.1 µg/mL的白屈菜红碱、3.125~25 µg/mL的原阿片碱和1.5625~25 µg/mL的别隐品碱对IPEC-1细胞的增殖具有明显的促进作用（P<0.05），且其促进作用呈剂量依赖性；由此可见，博落回生物碱在一定浓度范围、时间周期内可促进IPEC-1的增殖，这说明博落回生物碱提高动物生长性能可能是通过促进小肠上皮细胞增殖分化更新，从而增强小肠消化、吸收、免疫屏障和应激反应等功能的途径实现的。IPEC-1、HepG2细胞经不同浓度梯度（10-5~10-10mol/L）的胃泌素处理后，结果表明，10-7~10-10mol/L胃泌素对两种细胞增殖都具有显著的促进作用（P<0.05），而经高浓度10-5~10-6mol/L胃泌素处理的两种细胞与对照组相比均无显著性差异（P>0.05）。血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱和别隠品碱对IPEC-1细胞中胃泌素及其受体的表达有显著的上升（P<0.05），而对HepG2细胞中胃泌素及其受体的表达无显著性影响（P>0..此外，本研究发现博落回提取物对动物采食性能的影响可能是通过5-羟色胺介导调控的。5-羟色胺是色氨酸的重要代谢产物，是一种重要的神经递质，主要存在于脑组织和胃肠道,具有收缩微血管和升高血压的作用,与情绪、疼痛、攻击行为、睡眠、食欲等有密切关联，在体内可通过中枢和外周两种途径影响采食量，而本研究发现博落回提取物可以抑制色氨酸脱羧酶（DDC）的活性，从而提高色氨酸在体内的利用，由此可见，博落回提取物可能通过调节神经递质5-羟色胺的产生来调控动物的采食性能。