c-FLIP入核在乳腺癌转移及耐药中的作用及分子机制

Breast carcinoma is one of the most common malignancy in women, Metastasis is responsible for mortality in breast cancer patients. Fighting metastasis is a major challenge in clinical cancer therapy, researching the underlying mechanisms is particularly important. Cellular FLICE-inhibitory protein (c-FLIP) is a major anti-apoptotic protein that inhibits TRAIL-induced apoptosis in malignant cells. c-FLIP is high expressed in a variety of tumor cells including breast cancer, and is closely related to the apoptosis resistance of tumor. c-FLIP localizes in both the nucleus and cytoplasm. Nuclear c-FLIP can enhance the transcription of c-Jun and Wnt-beta-catenin downstream target genes, and involved in anti-Fas (CH-11) induced cell death. Our research shows that c-FLIP promoting the EMT of NSCLC cells by up-regulating N-Cadherin and Snail expression. Our preliminary research indicates that c-FLIP localizes in both the nucleus and cytoplasm in breast cancer cells. This subject will study the relationship between nuclear c-FLIP and the invasion and metastasis of breast cancer cells, search for the key target molecules of c-FLIP in this process by the analysis of changing in gene transcription.

作为女性最常见的恶性肿瘤之一，乳腺癌的转移是患者死亡最主要的原因，因此控制转移是临床治疗最大的挑战，其背后的机制研究尤为重要。c-FLIP是一个重要的抗凋亡蛋白，可以抑制TRAIL诱导的凋亡，在包括乳腺癌在内的多种肿瘤细胞中高表达，与肿瘤的凋亡抵抗密切相关。c-FLIP在胞浆与胞核均有分布，胞核中的c-FLIP能增强c-Jun和Wnt-β-catenin下游靶基因的转录,与anti-Fas(CH-11)诱导细胞死亡相关。我们的研究表明c-FLIP通过调节N-Cadherin和Snail的表达参与非小细胞肺癌的EMT过程；该项目已发现c-FLIP主要定位在乳腺癌细胞的胞核中，我们将继续研究定位于胞核的c-FLIP与乳腺癌细胞的侵袭转移之间的关系，并通过研究c-FLIP入核后引起基因转录水平的变化，确定c-FLIP调节的关键靶分子，探讨c-FLIP调控乳腺癌细胞侵袭转移的分子机制。

乳腺癌是严重威胁女性健康恶性肿瘤，乳腺癌的转移是影响乳腺癌治疗效果的重要限制因素，因此研究乳腺癌转移机制，寻找抑制转移的抗肿瘤药物对改善乳腺癌患者的预后意义重大。c-FLIP是一种含有死亡效应结构域(DED)的凋亡抑制蛋白，能够抑制肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)介导的细胞凋亡，与肿瘤发生发展关系密切。研究显示c-FLIP在胞浆与胞核中均有分布，入核的c-FLIP不仅可以增加Wnt信号下游基因的表达水平，还可以增加JNK的磷酸化水平，上调AP-1的转录活性，其在细胞核中的生物学效应和分子机制亟需更加深入的研究。针对乳腺癌的研究发现c-FLIP在转移的乳腺癌中相对高表达，间接提示c-FLIP的表达与乳腺癌的转移相关，同时，c-FLIP的高表达也与乳腺癌对TRAIL的耐药有关。本项目旨在研究c-FLIP出入核的影响因素、c-FLIP对乳腺癌细胞侵袭转移的影响以及肿瘤耐药的影响。.首先，我们明确了c-FLIP在乳腺癌细胞中浆核均有分布的细胞定位，利用构建的c-FLIP过表达的稳定细胞株的研究结果表明，在乳腺癌细胞中MDA-MB-231中c-FLIP并未明显促进细胞生长、克隆形成和侵袭转移；分析发现细胞因子TNFa、TGF-b 短时间处理细胞对c-FLIP出入核无明显影响，抗肿瘤小分子化合物和厚朴酚短时间处理细胞对c-FLIP出入核无明显影响。随后，我们研究发现乳腺癌细胞对TST杀伤的敏感性与重要分子c-FLIP、FoxM1蛋白表达水平相关，上调c-FLIP表达可促进乳腺癌细胞对噻唑类抗生素TST的耐药。我们发现C-FLIP在细胞和中与SFPQ、NONO存在相互作用，提示了c-FLIP在细胞核中的独特功能。本项目的研究结果提示了c-FLIP本身功能调节的复杂性，对开发抗乳腺癌药物及克服耐药具有理论指导意义。