IL-12介导的巨噬细胞分化在心脏纤维化中的机制研究

高血压心脏纤维化导致心衰和心律失常。炎症反应与高血压心脏纤维化发生发展相关。心肌中浸润的巨噬细胞是参与纤维化发生的重要因素，但巨噬细胞如何参与心脏纤维化的机制不清。巨噬细胞分化为M1和M2，二者功能不同。 IL-12可能调节巨噬细胞的分化。申请人利用血管紧张素II灌注致高血压心脏纤维化模型,进行前期研究表明敲除IL-12的P35亚基，M2型巨噬细胞增多，心脏纤维化加剧。但IL-12如何调节巨噬细胞的分化，分化不同的巨噬细胞在心脏纤维化中作用机制都不清楚。本研究通过IL-12的P35亚基敲除小鼠，明确IL-12对巨噬细胞分化的调节。结合体内实验，在体外建立细胞共培养体系，确定IL-12介导的巨噬细胞分化对心脏成纤维细胞增殖、凋亡和分化为肌成纤维细胞的作用，以及胶原合成的影响。阐明IL-12介导的巨噬细胞分化在纤维化发生中的作用机制。

高血压能引起血管重塑和心脏纤维化。近来研究发现巨噬细胞分化在高血压心脏重塑中发挥重要的作用，但是巨噬细胞分化的调节机制还不清楚。IL-12促进T细胞分化产生IFN-, IFN-是调控调控巨噬细胞分化的重要因子，这提示IL-12可能参与巨噬细胞分化进而调节高血压心脏纤维化。我们发现血管紧张素II（Ang II）灌注促进浸润的巨噬细胞产生IL-12。AngII灌注后，IL-12p35亚基敲除小鼠（IL-12p35KO）的心脏纤维化显著高于野生小鼠，并且伴随有大量F4/80+CD206+M2巨噬细胞聚集。同时M2巨噬细胞型基因，如Arg-1和Fizz1，表达增加。AngII直接刺激不影响p35KO巨噬细胞分化，但是当巨噬细胞与CD4T细胞共培养时， p35KO巨噬细胞向M2的分化显著高于WT巨噬细胞。体内和体外实验发现P35KO诱导的M2巨噬细胞分泌大量TGF-。通过巨噬细胞与成纤维细胞的三维共培养发现，P35KO诱导的M2巨噬细胞能促进心脏成纤维细胞活化，分泌大量胶原。给予TGF-b中和抗体能抑制M2巨噬细胞介导的心脏成纤维细胞活化。我们的研究提示IL-12缺失以CD4T细胞依赖的方式促进M2巨噬细胞分化，分泌TGF-b导致高血压心脏纤维化的发生。