L1CAM促进食管癌微环境中调节性T细胞浸润的机制研究

The progress of esophageal cancer is closely related to the tumor microenvironment. In our pre-study, infiltrative CD4+CD25+FOXP3+Treg (Regulatory T) cells and high expression of L1CAM (L1 Cell Adhesion Molecule) in tumor tissues have a significant positive correlation. Chemokine CCL22 involved in this process. We hypothesize that L1CAM expression in tumor tissues promotes the recruitment of Treg cells through regulated CCL22. In order to prove our hypothesis and possible mechanism, we will ues esophageal cancer cell lines and mice model to explor the relationship between L1CAM expression and Treg in tumor microenvironment on molecule, cell, tissue and animal levels. We also found that L1CAM is likely involved in the process of cisplatin chemoresistance. In this study, we will focus on the new field which the expreesion of L1CAM and Treg in tumor microenvironment to explor the occurrence and development of esophageal cancer. This study will provid new ideas for therapy of esophageal cancer.

食管癌的进展过程与肿瘤微环境密切相关。我们前期的研究发现，患者肿瘤组织中浸润的CD4+CD25+FOXP3+调节性T（Regulatory T，Treg）细胞数量与组织中L1细胞粘附分子（L1 Cell Adhesion Molecule，L1CAM）的高表达相关，并且这一过程有趋化因子CCL22的参与。我们假设食管鳞癌组织中L1CAM表达的上调通过调控CCL22表达促进了Treg细胞的招募。为了验证这一假说并了解其中可能的机制，我们将通过食管癌细胞系及裸鼠模型，从分子、细胞、组织及动物的水平来探讨L1CAM的表达与肿瘤微环境中Treg细胞的关系及可能的机制。我们还发现L1CAM很可能参与了顺铂化疗耐药的过程。本研究从L1CAM的表达与CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的关系这一新的角度，探索食管鳞癌发生发展的基础，为食管癌的治疗提供新的思路。

L1 细胞粘附分子 (L1CAM) 在多种肿瘤中表现出致癌活性。然而，在食管鳞状细胞癌 (ESCC) 患者中，L1CAM的表达及与肿瘤微环境之间的关系仍不明确。在本课题，我们研究了 ESCC 中 L1CAM 的表达对肿瘤细胞生物学行为和肿瘤微环境的影响。收集人 ESCC 样本，通过荧光定量 PCR 和免疫组织化学检测 L1CAM 的 mRNA 和蛋白质表达水平。过表达和敲低L1CAM基因表达用于机制的研究。通过CCK-8和流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期。用Transwell 方法测量细胞迁移和侵袭能力。为了探究L1CAM的表达是否对肿瘤微环境有影响，我们进行了多重细胞因子测定以识别 L1CAM 下游的因素。在裸鼠中进行移植瘤研究以评估 L1CAM 表达对肿瘤生长和调节性 T 细胞 (Treg) 募集的影响。 研究结果表明L1CAM 表达在 ESCC 组织中显著升高（P < 0.001）并与患者较差的预后相关（P < 0.05）。ESCC细胞中降低L1CAM的表达抑制了肿瘤的生长和迁移，并增加了肿瘤细胞的凋亡（P < 0.05）。在肿瘤微环境中，L1CAM 表达通过影响 CCL22分泌从而影响 ESCC 中的 Treg 细胞的浸润。从机制上讲，L1CAM 通过激活 PI3K/Akt/NF-κB 信号通路促进 CCL22的表达，CCL22的表达促进 Treg 细胞募集到肿瘤部位；同时Treg 细胞分泌 TGF-β，TGF-β 反过来通过 Smad2/3促进 L1CAM 表达，以上就形成了一个正反馈循环。我们的研究结果为 L1CAM 介导的免疫逃逸机制提供了新的见解，表明靶向肿瘤细胞和肿瘤微环境Treg 之间的 L1CAM-CCL22-TGF-β 这一环路，可能为改善 ESCC 患者的治疗提供独特的手段。