家族性病态窦房结综合症离子通道及相关基因分子遗传学研究

本项目采用分子生物学、分子遗传学方法，结合生物信息学、基因转染和膜片钳技术，走基因与功能研究相结合的研究路线, 从表型-基因-基因产物，以具有稳定遗传特征的家族性病态窦房结综合征家系为研究对象,通过系谱分析明确遗传方式。采用387个STR遗传标志进行全基因组扫描，连锁分析，定位致病基因所在的染色体及相关区间，在区间内选择更密集的STR位点进行精细扫描和连锁分析，将致病基因定位于1cM范围内，利用网络数据库检索区间内的离子通道及相关基因，选择相应的SRT遗传标志，定位和确定致病基因。用PCR-SSCP方法对致病基因进行基因突变分析, 对突变基因片段扩增,测序，确定基因突变位点。通过定点诱变基因重组技术，将突变基因转染到爪蟾卵母细胞表达突变离子通道，膜片钳进行全细胞功能检测，并与野生型离子通道进行对比，以证明所确定的离子通道及相关基因是家族性SSS的致病基因。