细胞质脂滴的纯化及其蛋白和脂类组学研究

脂滴作为一个多功能的细胞器，不但在细胞中起到重要作用，而且还与人类的许多代谢疾病密切相关，它的研究成为近几年来生物学领域里的一个热点。目前对脂滴的研究仍处于起步阶段，主要工作还是分析鉴定脂滴的蛋白及脂类组成。近几年来虽有10多篇关于脂滴蛋白组学及脂类组学研究的报道，但所有这些工作都存在着一个主要问题，即均发现脂滴上带有一些内质网蛋白。这意味着部分已确定的脂滴脂类及蛋白极有可能来自内质网，这很有可能误导脂滴的研究。为解决这个问题，我们正着手建立进一步分离纯化脂滴的方法，如分步离心法，亲和去除内质网法及阻碍脂滴与内质网结合的调控法等，争取获得不带内质网的脂滴并以此进行全蛋白组学和比较蛋白组学分析，用比较这两种组学的结果来确定脂滴自身的蛋白组成。同时，对纯化的内质网脂滴进行分析，揭示脂滴作用于内质网的分子机制，以及两细胞器相互作用引起的胰岛素信号抑制的分子机理。